ಲೈಸಿಂಗ್ ಇಲ್ಲದೆ ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದಲ್ಲಿ ಲ್ಯುಕೋಸೈಟ್ಗಳ ನೇರ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ

ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದಲ್ಲಿನ ಲ್ಯುಕೋಸೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸುವುದು ಕ್ಲಿನಿಕಲ್ ಲ್ಯಾಬ್ ಅಥವಾ ಬ್ಲಡ್ ಬ್ಯಾಂಕ್‌ನಲ್ಲಿ ವಾಡಿಕೆಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಾಗಿದೆ.ಲ್ಯುಕೋಸೈಟ್‌ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯು ರಕ್ತದ ಶೇಖರಣೆಯ ಗುಣಮಟ್ಟದ ನಿಯಂತ್ರಣವಾಗಿ ಪ್ರಮುಖ ಸೂಚ್ಯಂಕವಾಗಿದೆ.ಲ್ಯುಕೋಸೈಟ್ ಹೊರತುಪಡಿಸಿ, ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತವು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಪ್ಲೇಟ್‌ಲೆಟ್‌ಗಳು, ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಅಥವಾ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಶಿಲಾಖಂಡರಾಶಿಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಸೂಕ್ಷ್ಮದರ್ಶಕ ಅಥವಾ ಪ್ರಕಾಶಮಾನವಾದ ಕ್ಷೇತ್ರ ಕೋಶ ಕೌಂಟರ್ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತವನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಅಸಾಧ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ.ಬಿಳಿ ರಕ್ತ ಕಣಗಳನ್ನು ಎಣಿಸುವ ಸಾಂಪ್ರದಾಯಿಕ ವಿಧಾನಗಳು RBC ಲೈಸಿಸ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ಇದು ಸಮಯ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುತ್ತದೆ.

AOPI ಡ್ಯುಯಲ್-ಫ್ಲೋರೊಸೆಸ್ ಎಣಿಕೆಯು ಜೀವಕೋಶದ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಲು ಬಳಸುವ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಪ್ರಕಾರವಾಗಿದೆ.ಪರಿಹಾರವು ಅಕ್ರಿಡಿನ್ ಕಿತ್ತಳೆ (ಹಸಿರು-ಪ್ರತಿದೀಪಕ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲದ ಸ್ಟೇನ್) ಮತ್ತು ಪ್ರೊಪಿಡಿಯಮ್ ಅಯೋಡೈಡ್ (ಕೆಂಪು-ಫ್ಲೋರೊಸೆಂಟ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಸಿಡ್ ಸ್ಟೇನ್) ಸಂಯೋಜನೆಯಾಗಿದೆ.ಪ್ರೊಪಿಡಿಯಮ್ ಅಯೋಡೈಡ್ (PI) ಒಂದು ಪೊರೆಯ ಹೊರಗಿಡುವ ಬಣ್ಣವಾಗಿದ್ದು, ಇದು ಕೇವಲ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಪೊರೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಪ್ರವೇಶಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಅಕ್ರಿಡೈನ್ ಕಿತ್ತಳೆ ಜನಸಂಖ್ಯೆಯಲ್ಲಿನ ಎಲ್ಲಾ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ಭೇದಿಸಬಲ್ಲದು.ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಎರಡೂ ಬಣ್ಣಗಳು ಇದ್ದಾಗ, ಪ್ರೊಪಿಡಿಯಮ್ ಅಯೋಡೈಡ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ರೆಸೋನೆನ್ಸ್ ಎನರ್ಜಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫರ್ (FRET) ಮೂಲಕ ಆಕ್ರಿಡೈನ್ ಕಿತ್ತಳೆ ಪ್ರತಿದೀಪಕದಲ್ಲಿ ಕಡಿತವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ.ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ, ಅಖಂಡ ಪೊರೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೇಟೆಡ್ ಕೋಶಗಳು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಹಸಿರು ಬಣ್ಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಲೈವ್ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ರಾಜಿ ಪೊರೆಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೇಟೆಡ್ ಕೋಶಗಳು ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣವನ್ನು ಮಾತ್ರ ಬಣ್ಣಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು Countstar® Rigel ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸುವಾಗ ಸತ್ತಂತೆ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ಅನೇಕ ಸಂಕೀರ್ಣ ಜೀವಕೋಶದ ಜನಸಂಖ್ಯೆಯ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಿಗೆ ಸೂಕ್ತ ಪರಿಹಾರವಾಗಿದೆ, ಇದು ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದಲ್ಲಿನ ಬಿಳಿ-ರಕ್ತ-ಕಣಗಳನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲು ಅನುವು ಮಾಡಿಕೊಡುತ್ತದೆ.

ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ವಿಧಾನ:

1.20 µl ರಕ್ತದ ಮಾದರಿಯನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಿ ಮತ್ತು ಮಾದರಿಯನ್ನು 180 µl PBS ನಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿ.
2.12µl ಮಾದರಿಗೆ 12µl AO/PI ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಿ, ನಿಧಾನವಾಗಿ ಪೈಪೆಟ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಬೆರೆಸಲಾಗುತ್ತದೆ;
3.20µl ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಚೇಂಬರ್ ಸ್ಲೈಡ್‌ಗೆ ಎಳೆಯಿರಿ;
4. ಜೀವಕೋಶಗಳು ಸುಮಾರು 1 ನಿಮಿಷ ಕೊಠಡಿಯಲ್ಲಿ ನೆಲೆಗೊಳ್ಳಲು ಅನುಮತಿಸಿ;
5. ಸ್ಲೈಡ್ ಅನ್ನು ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ಎಫ್‌ಎಲ್ ಉಪಕರಣಕ್ಕೆ ಕೀಟ ಹಾಕಿ;
6. "AO/PI ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆ" ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಆರಿಸಿ, ನಂತರ ಈ ಮಾದರಿಗಾಗಿ ಮಾದರಿ ID ಅನ್ನು ನಮೂದಿಸಿ.
7. ಡಿಲ್ಯೂಷನ್ ಅನುಪಾತ, ಸೆಲ್ ಪ್ರಕಾರವನ್ನು ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಿ, ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಲು 'ರನ್' ಕ್ಲಿಕ್ ಮಾಡಿ.

ಎಚ್ಚರಿಕೆ: AO ಮತ್ತು PI ಸಂಭಾವ್ಯ ಕಾರ್ಸಿನೋಜೆನ್ ಆಗಿದೆ.ಚರ್ಮ ಮತ್ತು ಕಣ್ಣುಗಳೊಂದಿಗೆ ನೇರವಾಗಿ ಸಂಪರ್ಕವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಆಪರೇಟರ್ ವೈಯಕ್ತಿಕ ರಕ್ಷಣಾ ಸಾಧನಗಳನ್ನು (PPE) ಧರಿಸಲು ಶಿಫಾರಸು ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.

ಫಲಿತಾಂಶ:

1. ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದ ಬ್ರೈಟ್ ಫೀಲ್ಡ್ ಚಿತ್ರ

ಇಡೀ ರಕ್ತದ ಪ್ರಕಾಶಮಾನವಾದ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ, ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳ ನಡುವೆ WBC ಗಳು ಗೋಚರಿಸುವುದಿಲ್ಲ.(ಚಿತ್ರ 1)

ಚಿತ್ರ 1 ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದ ಪ್ರಕಾಶಮಾನವಾದ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಚಿತ್ರ.

2. ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಚಿತ್ರ

AO ಮತ್ತು PI ಬಣ್ಣವು ಜೀವಕೋಶಗಳ ಜೀವಕೋಶದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಕಲೆಗಳ DNAಗಳಾಗಿವೆ.ಆದ್ದರಿಂದ, ಕಿರುಬಿಲ್ಲೆಗಳು, ಕೆಂಪು ರಕ್ತ ಕಣಗಳು ಅಥವಾ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಅವಶೇಷಗಳು ಲ್ಯುಕೋಸೈಟ್ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯ ಫಲಿತಾಂಶದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಲು ಸಾಧ್ಯವಾಗುವುದಿಲ್ಲ.ಲೈವ್ ಲ್ಯುಕೋಸೈಟ್‌ಗಳು (ಹಸಿರು) ಮತ್ತು ಸತ್ತ ಲ್ಯುಕೋಸೈಟ್‌ಗಳು (ಕೆಂಪು) ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಚಿತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ.(ಚಿತ್ರ 2)

ಚಿತ್ರ 2 ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಚಿತ್ರಗಳು.(ಎ)AO ಚಾನೆಲ್‌ನ ಚಿತ್ರ;(ಬಿ) ಪಿಐ ಚಾನೆಲ್‌ನ ಚಿತ್ರ;(C) AO ಮತ್ತು PI ಚಾನಲ್‌ನ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ವಿಲೀನಗೊಳಿಸಿ.

3. ಲ್ಯುಕೋಸೈಟ್ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆ

Countstar FL ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತವಾಗಿ ಮೂರು ಚೇಂಬರ್ ವಿಭಾಗಗಳ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಎಣಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಒಟ್ಟು WBC ಸೆಲ್ ಎಣಿಕೆ (1202), ಸಾಂದ್ರತೆ (1.83 x 106 ಜೀವಕೋಶಗಳು/ಮಿಲಿ), ಮತ್ತು % ಕಾರ್ಯಸಾಧ್ಯತೆಯ (82.04%) ಸರಾಸರಿ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಾಚಾರ ಮಾಡುತ್ತದೆ.ಹೆಚ್ಚುವರಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಅಥವಾ ಡೇಟಾ ಆರ್ಕೈವಿಂಗ್‌ಗಾಗಿ ಸಂಪೂರ್ಣ ರಕ್ತದ ಚಿತ್ರಗಳು ಮತ್ತು ಡೇಟಾವನ್ನು ಸುಲಭವಾಗಿ PDF, ಇಮೇಜ್ ಅಥವಾ ಎಕ್ಸೆಲ್ ಆಗಿ ರಫ್ತು ಮಾಡಬಹುದು.

ಚಿತ್ರ 3 ಕೌಂಟ್‌ಸ್ಟಾರ್ ರಿಜೆಲ್ ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್‌ನ ಸ್ಕ್ರೀನ್‌ಶಾಟ್