ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್
ಸೈಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ % ಅನ್ನು ಕೆಳಗಿನ ಸಮೀಕರಣದಿಂದ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗುತ್ತದೆ.
ಸೈಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ % = (ನಿಯಂತ್ರಣದ ಲೈವ್ ಎಣಿಕೆಗಳು - ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳ ಲೈವ್ ಎಣಿಕೆಗಳು) / ನಿಯಂತ್ರಣದ ಲೈವ್ ಎಣಿಕೆಗಳು × 100
ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಟ್ಯೂಮರ್ ಕೋಶಗಳನ್ನು ವಿಷಕಾರಿಯಲ್ಲದ, ವಿಕಿರಣಶೀಲವಲ್ಲದ ಕ್ಯಾಲ್ಸಿನ್ AM ನೊಂದಿಗೆ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಅಥವಾ GFP ಯೊಂದಿಗೆ ವರ್ಗಾವಣೆ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ, ನಾವು CAR-T ಜೀವಕೋಶಗಳಿಂದ ಗೆಡ್ಡೆಯ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಕೊಲ್ಲುವುದನ್ನು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಬಹುದು.ಲೈವ್ ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಕ್ಯಾನ್ಸರ್ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಹಸಿರು ಕ್ಯಾಲ್ಸಿನ್ AM ಅಥವಾ GFP ಯಿಂದ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತದೆ, ಸತ್ತ ಜೀವಕೋಶಗಳು ಹಸಿರು ಬಣ್ಣವನ್ನು ಉಳಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಸಾಧ್ಯವಿಲ್ಲ.Hoechst 33342 ಅನ್ನು ಎಲ್ಲಾ ಕೋಶಗಳನ್ನು (T ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಗೆಡ್ಡೆಯ ಕೋಶಗಳೆರಡೂ) ಕಲೆಹಾಕಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಪರ್ಯಾಯವಾಗಿ, ಗುರಿಯ ಗೆಡ್ಡೆಯ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಪೊರೆಯ ಬಂಧಿತ ಕ್ಯಾಲ್ಸಿನ್ AM ನೊಂದಿಗೆ ಬಣ್ಣ ಮಾಡಬಹುದು, PI ಅನ್ನು ಸತ್ತ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು (T ಜೀವಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಗೆಡ್ಡೆಯ ಕೋಶಗಳೆರಡೂ) ಕಲೆ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ.ಈ ಕಲೆ ಹಾಕುವ ತಂತ್ರವು ವಿಭಿನ್ನ ಕೋಶಗಳ ತಾರತಮ್ಯವನ್ನು ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ.
ಇ: K562 ರ T ಅನುಪಾತ ಅವಲಂಬಿತ ಸೈಟೊಟಾಕ್ಸಿಸಿಟಿ
ಉದಾಹರಣೆ Hoechst 33342, CFSE, PI ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಚಿತ್ರಗಳು t = 3 ಗಂಟೆಗಳಲ್ಲಿ K562 ಗುರಿ ಕೋಶಗಳಾಗಿವೆ.
ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಚಿತ್ರಗಳು Hoechst+CFSE+PI+ ಟಾರ್ಗೆಟ್ ಸೆಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ E: T ಅನುಪಾತ ಹೆಚ್ಚಿದಂತೆ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ತೋರಿಸಿದವು.
