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줄기 세포 치료를 위한 생존력, 형태 및 표현형 결정

중간엽 줄기세포는 중배엽에서 분리할 수 있는 만능 줄기세포의 하위 집합입니다.자기 복제 재생 및 다방향 분화 특성으로 인해 의학에서 다양한 치료법에 대한 높은 잠재력을 보유하고 있습니다.중간엽 줄기세포는 독특한 면역 표현형과 면역 조절 능력을 가지고 있습니다.따라서 간엽줄기세포는 이미 줄기세포이식, 조직공학, 장기이식 등에 널리 이용되고 있다.그리고 이러한 응용 외에도 일련의 기본 및 임상 연구 실험에서 파종 세포로 조직 공학의 이상적인 도구로 사용됩니다.

은 이러한 줄기 세포의 생산 및 분화 동안 농도, 생존력, 세포자멸사 분석 및 표현형 특성(및 그 변화)을 모니터링할 수 있습니다. 은 또한 세포 품질 모니터링의 전체 프로세스 동안 영구 명시야 및 형광 기반 이미지 기록에 의해 제공되는 추가 형태학적 정보를 얻는 이점이 있습니다. 은 줄기 세포의 품질 관리를 위한 빠르고 정교하며 신뢰할 수 있는 방법을 제공합니다.

 

 

재생 의학에서 MSC의 생존력 모니터링

 

그림 1 세포 치료에 사용하기 위한 중간엽 줄기 세포(MSC)의 생존력 및 세포 수 모니터링

 

줄기세포는 재생 세포 치료에서 가장 유망한 치료법 중 하나입니다.MSC 수확에서 치료에 이르기까지 줄기 세포 생산의 모든 단계에서 높은 줄기 세포 생존력을 유지하는 것이 중요합니다(그림 1). 의 줄기 세포 계수기는 품질 관리에서 중요한 역할을 하기 위해 줄기 세포의 생존 능력과 농도를 모니터링합니다.

 

 

운송 후 MSC 형태 변화 모니터링

 

직경과 응집도 에 의해 결정되었습니다.AdMSC의 직경은 운송 전과 비교할 때 운송 후 크게 변경되었습니다.수송 전의 직경은 19μm였으나 수송 후에는 21μm로 증가하였다.운송 전의 집계는 20%였으나 운송 후에는 25%로 증가하였다. 이 캡처한 이미지에서 AdMSC의 표현형은 운송 후 크게 변경되었습니다.결과는 그림 3에 나와 있습니다.

 

 

세포 표현형에서 AdMSC의 식별

현재 모니터링되는 MSC의 품질 보증을 위한 최소 표준 식별 테스트 절차는 2006년에 이미 정의된 ISCT(International Society for Cellular Therapy)의 성명서에 나열되어 있습니다.

 

 

FITC Conjugated Annexin-V 및 7-ADD 도입으로 MSC에서 세포자멸사를 빠르게 감지

세포 사멸은 FITC conjugated annexin-V 및 7-ADD로 감지할 수 있습니다.PS는 일반적으로 건강한 세포에서 원형질막의 세포내 첨판에서만 발견되지만 초기 세포자멸사 동안 막 비대칭이 손실되고 PS는 외부 첨판으로 이동합니다.

 

그림 6 Countstar Rigel 에 의한 MSC의 세포자멸사 검출

A. MSCs의 세포자멸사 검출 형광 이미지의 육안 검사
B. FCS 익스프레스에 의한 MSC의 아폽토시스 산점도
C. 정상 세포 %, 세포 사멸 %, 괴사/매우 후기 세포 사멸 세포 %를 기준으로 한 세포 집단의 백분율.

 

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