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Countstar FL에 의한 AdMSC의 면역 표현형 결정

면역표현형분석은 다양한 질병(자가면역질환, 면역결핍질환, 종양진단, 지혈, 알레르기 질환 등) 및 질병의 병리를 진단하기 위해 세포 관련 연구 분야에서 수행되는 대표적인 실험입니다.또한 다양한 세포 질환 연구에서 세포 품질을 테스트하는 데 사용됩니다.면역 표현형 분석에 사용되는 세포 질환 연구 기관에서는 유동 세포 계측법 및 형광 현미경이 일상적인 분석 방법입니다.그러나 이러한 분석 방법은 이미지 또는 데이터 시리즈만 제공할 수 있으므로 규제 당국의 엄격한 승인 요구 사항을 충족하지 못할 수 있습니다.

 

M Dominici el, Cytotherapy (2006) Vol.8, 4, 315-317

 

 

AdMSC의 면역 표현형 식별

AdMSC의 면역표현형은 FL에 의해 결정되었고, AdMSC는 각각 다른 항체(CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 및 HLADR)와 함께 배양되었습니다.녹색 채널을 이미지 PE 형광 및 명시야로 설정하여 신호 색상 적용 절차를 만들었습니다.명시야 사진 참조 분할은 PE 형광 신호를 샘플링하기 위한 마스크로 적용되었습니다.CD105의 결과가 표시되었습니다(그림 1).

 

그림 1 AdMSC의 면역 표현형 식별.A. AdMSC의 명시야 및 형광 이미지;B. FL에 의한 AdMSC의 CD 마커 검출

 

 

MSC의 품질 관리 – 각 단일 셀에 대한 결과 검증

 

 

그림 2 A: FL 결과는 FCS express 5plus에 표시되었으며, CD105의 양성 백분율과 개요 표 단일 세포를 제어합니다.B: 오른쪽으로 조정된 게이팅, 단일 세포 표의 이미지는 CD105의 높은 발현을 가진 세포를 보여줍니다.C: 왼쪽으로 조정된 게이팅, 단일 세포 표의 이미지는 CD105의 발현이 낮은 세포를 보여줍니다.

 

 

운송 중 표현형 변화

 

그림 3. A: FCS express 5 plus 소프트웨어에 의한 다양한 샘플의 CD105 양성 백분율의 정량적 분석.B: 고품질 이미지는 추가적인 형태학적 정보를 제공합니다.C: 각 단일 셀의 썸네일로 검증된 결과, FCS 소프트웨어 도구는 셀을 다른 셀로 나눴습니다.

 

 

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