Veqetî: Hucreyên stem ên mesenkîmal binekomek hucreyên bingehîn ên pirpotent in ku dikarin ji mezodermê werin veqetandin.Bi nûvekirina xwe-veberhevkirinê û taybetmendiyên cihêrengiya pir-rêveberiyê, ew ji bo dermanên cihêreng ên di derman de potansiyelek bilind in.Hucreyên stem ên mesenchymal xwedan fenotîpek xweparastinê û şiyana rêziknameya xweparastinê ye.Ji ber vê yekê, hucreyên stem ên mesenchymal jixwe di veguheztina hucreyên stem, endezyariya tevnvîsê, û veguheztina organan de bi berfirehî têne bikar anîn.Û Ji xeynî van serîlêdanan, ew wekî amûrek îdeal di endezyariya tevnvîsê de wekî hucreyên seder di rêzek ceribandinên lêkolîna bingehîn û klînîkî de têne bikar anîn.Heya nuha, ji bo kontrolkirina kalîteyê ya hucreyên stem ên mesenchymal, rêbaz û standardek bi gelemperî nayê pejirandin.Countstar Rigel dikare di dema hilberandin û cûdakirina van hucreyên stem de hûrbûn, zindîbûn, û taybetmendiyên fenotîpê (û guheztinên wan) bişopîne.Di heman demê de Countstar Rigel di bidestxistina agahdariya morfolojîkî ya zêde de jî xwedan avantaj e, ku di tevahiya pêvajoya şopandina qalîteya hucreyê de ji hêla ronahiya domdar û tomarên wêne-based fluorescence ve hatî peyda kirin.Countstar Rigel ji bo kontrolkirina kalîteyê ya hucreyên stem rêbazek bilez, sofîstîke û pêbawer pêşkêşî dike.
Materyal û rêbaz:
Hucreyên stem ên mesenchymal ên ji adipose-dervekirî (AdMSCs) ji hêla Profesor Nianmin Qi, çareseriya rengdêra AO/PI (Shanghai RuiYu, CF002) ve hatî diyar kirin.Antibody: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (BD Company).
AdMSCs di inkubatorek şilkirî ya 37℃, 5% CO2 de hatin çandin.Berî ku bikar bînin, bi trypsin vexwin.
Prosedûra nîgarkirina nîşankera CD-yê wekî manuala antîpodê hate şopandin.
Vedîtina nîşankera CD bi Countstar Rigel:
1. Pêvajoyek serîlêdana reng-rengê bi danîna kanala PE-ê ji bo wêneya floransê ya PE hate afirandin.
2. Ji her odeyekê 3 zevî hatin girtin.
3. Piştî ku wênekirin û analîza destpêkê temam bûn, mîhenga bend (dergehê têketinê) ji bo veguheztina erênî û neyînî ji hêla nermalava FCS ve hate danîn.
Kontrolkirina kalîteyê ya hucreya stem
Nîgara jêrîn (Wêne 1) prosedurê nîşan dide tedawiya hucreyên stem .
Wêne 1: Pêvajoya ji bo dermankirina hucreyên stem
Encam:
Tespîtkirina hûrbûn, zindîbûn, pîvan, û kombûna AdMSCs.
Zindîbûna AdMSC ji hêla AO/PI ve hate destnîşankirin, pêvajoyek serîlêdanê ya du-reng hate afirandin bi danîna kanala Kesk û kanala Sor ji bo wêneya floransê ya AO û PI-yê, zêdeyî zeviyek geş.Wêneyên nimûne di jimar 2 de hatin nîşandan.
Wêne 2. Wêneyên berî veguhestinê û piştî veguhestina AdMSCs.A. Berî veguhestinê;wêneyek nûner tê nîşandan.B. Piştî veguhestinê;wêneyek nûner tê nîşandan.
Zehmetiya AdMSC-ê piştî veguheztinê dema ku bi berê veguheztinê re hate berhev kirin bi tundî hate guheztin.Beriya veguheztinê 92% bû, lê piştî veguheztinê ji sedî 71 kêm bû.Encam di jimar 3 de hate xuyang kirin.
Wêne 3. Encamên zindîbûna AdMSCs (Berî veguheztinê û piştî veguheztinê)
Dirêj û kombûn jî ji hêla Countstar Rigel ve hate destnîşankirin.Pîvana AdMSCs piştî veguheztinê gava ku bi berê veguheztinê re hate berhev kirin bi tundî hate guheztin.Dirêjiya beriya veguhastinê 19 μm bû, lê piştî veguheztinê ew 21 μm zêde bû.Berhevkirina berî veguhastinê %20 bû, lê piştî veguheztinê ji %25 zêde bû.Ji wêneyên ku ji hêla Countstar Rigel ve hatine girtin, fenotîpa AdMSC piştî veguhestinê bi tundî hate guheztin.Encam di Xiflteya 4 de hatin nîşandan.
Wêne 4: Encamên pîvan û kombûnê.A: Wêneyên nûnerê AdMSCs, fenotîpa AdMSCs piştî veguheztinê bi tundî hate guheztin.B: Kombûna beriya veguhastinê %20 bû, lê piştî veguheztinê ji %25 zêde bû.C: Çermê berî veguhestinê 19 μm bû, lê piştî veguhestinê 21 μm zêde bû.
Ji hêla Countstar Rigel ve immunophenotype ya AdMSCs destnîşan bikin
Immunophenotype ya AdMSCs ji hêla Countstar Rigel ve hate destnîşankirin, AdMSCs bi rêzê ve bi antîpotek cûda ve hatin inkub kirin (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).Pêvajoyek serîlêdana reng-rengê bi danîna kanalek Kesk ji bo wênekirina fluorescence PE, plus zeviyek geş hate afirandin.Dabeşkirina referansa wêneya zeviya ronî wekî maskek hate sepandin da ku nîşana fluorescence PE-ê nîşan bide.Encamên CD105 hatin nîşandan (Wêne 5).
Wêne 5: Encamên CD105 yên AdMSCs ji hêla Countstar Rigel ve hatin destnîşankirin.A: Analîzkirina hejmarî ya rêjeya erênî ya CD105 di nimûneyên cihêreng de ji hêla nermalava FCS Express 5 plus ve.B: Wêneyên kalîteya bilind agahdariya morfolojîkî ya din peyda dikin.C: Encamên pejirandî ji hêla hûrguliyên her şaneyek yekane ve, amûrên nermalava FCS şaneyan li gorî vegotina proteînên wan ên cihêreng li komên cihê dabeş kirin.
Encamên din ên antîbodî di Fig 6 de hatin xuyang kirin
Wêne 6: A: Wêneyek nûnerê ASC-yên bi morfolojiya tîpîk-spindle.Bi mîkroskopa OLYMPUS hatiye girtin.Mezinkirina eslî, (10x).B: Cûdahiya adipogenîk a ASC-ê ji hêla rûkeniya Red Ruthenium ve tête diyar kirin ku deverên mîneralîzasyonê nîşan dide.Bi mîkroskopa OLYMPUS hatiye girtin.Mezinkirina orjînal (10x).C: Taybetmendiya FL ya Countstar a ASCs.
Berhevkirinî:
Countstar FL dikare di dema hilberandin û cihêbûna van hucreyên stem de hûrbûn, zindîbûn, û taybetmendiyên fenotîp (û guhertinên wan) bişopîne.FCS express fonksiyonê peyda dike ku her hucreya nîşanê binirxîne, daneyan bi navgîniya wêneyê verast bike.Bikarhêner di heman demê de dikare xwedan pêbaweriyê be ku ceribandinên paşîn li ser bingeha encamên Countstar Rigel pêk bîne.Countstar Rigel ji bo kontrolkirina kalîteyê ya hucreyên stem rêbazek bilez, sofîstîke û pêbawer pêşkêşî dike.
