AOPI Dual-fluoresces эсептөө клетка концентрациясын жана жашоого жөндөмдүүлүгүн аныктоо үчүн колдонулган анализ түрү болуп саналат.Эритме акридин кызгылт сары (жашыл-флуоресценттик нуклеин кислотасынын боеги) жана пропидий йодидинин (кызыл-флуоресценттик нуклеин кислотасынын такынын) айкалышы.Propidium йодид (PI) акридин апельсин популяциянын бардык клеткаларына кире алат, ал эми кабыкчалары бузулган клеткаларга гана кирүүчү мембрананы жокко чыгаруучу боёк.Эки боёк тең ядродо болгондо, пропидий йодид флуоресценттик резонанстык энергиянын (FRET) өтүшү менен акридин кызгылт сары флуоресценциянын азайышын шарттайт.Натыйжада, кабыкчалары бузулбаган ядролуу клеткалар флуоресценттик жашыл түскө боёп, тирүү деп эсептелет, ал эми мембранасы бузулган ядролуу клеткалар флуоресценттик кызыл түскө гана боёйт жана Countstar® FL тутумун колдонууда өлүк деп эсептелет.Эритроциттер, тромбоциттер жана калдыктар сыяктуу ядросуз материал флуоресценттенбейт жана Countstar® FL программасы тарабынан этибарга алынбайт.
Уңгу клетка терапиясынын процесси
4-сүрөт Клетка терапияларында колдонуу үчүн мезенхималдык өзөк клеткаларынын (MSCs) жашоо жөндөмдүүлүгүнө жана клеткаларынын санынын мониторинги.
AO/PI жана Trypan Blue анализи менен MSC жашоо жөндөмдүүлүгүн аныктоо
Figure 2. A. AO/PI жана Trypan Blue менен боёлгон MSC сүрөтү;2. AO / PI жана Trypan көк натыйжасын ташуу чейин жана кийин салыштыруу.
Клетканын сынуу көрсөткүчү өзгөрөт, Trypan Blue боёгу анчалык ачык болгон эмес, аны ташуудан кийин жашоого жөндөмдүүлүгүн аныктоо кыйын.Кош түстүү флуоресценция тирүү жана өлүк ядролуу клеткаларды боёого мүмкүндүк берет, ал эми калдыктар, тромбоциттер жана эритроциттердин катышуусунда да так жашоого жөндөмдүү натыйжаларды жаратат.
