Experimentell Protokoll
D'Zytotoxizitéit% gëtt duerch d'Equatioun hei drënner berechent.
Cytotoxicity % = (Live counts of control – Live counts of behandelt) / Live counts of control × 100
Andeems Dir d'Zil-Tumorzellen mat net-gëfteg, net-radioaktiven Calcein AM oder transfektéiert mat GFP markéiert, kënne mir d'Tötung vun den Tumorzellen duerch CAR-T Zellen iwwerwaachen.Wärend lieweg Zilkriibszellen vun engem grénge Kalcein AM oder GFP markéiert ginn, kënnen déi doudege Zellen de grénge Faarfstoff net behalen.Hoechst 33342 gëtt benotzt fir all Zellen (souwuel T Zellen an Tumorzellen) ze stainéieren, alternativ kënnen Zil-Tumorzellen mat Membran gebonnen Calcein AM gefierft ginn, PI gëtt benotzt fir déi doudege Zellen (souwuel T Zellen an Tumorzellen) ze stainéieren.Dës Faarfstrategie erlaabt d'Diskriminéierung vu verschiddenen Zellen.
E: T Verhältnis ofhängeg Cytotoxicity vun K562
D'Beispill Hoechst 33342, CFSE, PI fluoreszent Biller sinn d'K562 Zilzellen bei t = 3 Stonnen
Déi doraus resultéierend fluorescent Biller weisen Erhéijung vun Hoechst + CFSE + PI + Zilzellen als E: T Verhältnis erhéicht
