ບົດຄັດຫຍໍ້: ຈຸລັງລໍາຕົ້ນ Mesenchymal ແມ່ນຊຸດຍ່ອຍຂອງຈຸລັງລໍາຕົ້ນຂອງ pluripotent ທີ່ສາມາດແຍກອອກຈາກ mesoderm ໄດ້.ດ້ວຍການຕໍ່ອາຍຸການທົດລອງດ້ວຍຕົນເອງແລະລັກສະນະທີ່ແຕກຕ່າງຫຼາຍທິດ, ພວກເຂົາເຈົ້າມີທ່າແຮງສູງໃນການປິ່ນປົວຕ່າງໆໃນຢາ.ຈຸລັງລໍາຕົ້ນ Mesenchymal ມີ phenotype ພູມຕ້ານທານທີ່ເປັນເອກະລັກແລະຄວາມສາມາດໃນການຄວບຄຸມພູມຕ້ານທານ.ດັ່ງນັ້ນ, ຈຸລັງລໍາຕົ້ນ mesenchymal ໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນການປູກຖ່າຍຈຸລັງລໍາຕົ້ນ, ວິສະວະກໍາເນື້ອເຍື່ອ, ແລະການປູກຖ່າຍອະໄວຍະວະ.ແລະນອກເຫນືອຈາກຄໍາຮ້ອງສະຫມັກເຫຼົ່ານີ້, ພວກມັນຖືກນໍາໃຊ້ເປັນເຄື່ອງມືທີ່ເຫມາະສົມໃນວິສະວະກໍາເນື້ອເຍື່ອເປັນຈຸລັງ seeder ໃນຊຸດຂອງການທົດລອງການຄົ້ນຄວ້າຂັ້ນພື້ນຖານແລະທາງດ້ານການຊ່ວຍ.ມາຮອດປັດຈຸບັນ, ບໍ່ມີວິທີການແລະມາດຕະຖານທີ່ຍອມຮັບຢ່າງກວ້າງຂວາງສໍາລັບການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຂອງຈຸລັງລໍາຕົ້ນ mesenchymal.Countstar Rigel ສາມາດຕິດຕາມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ, ຄວາມເປັນໄປໄດ້, ແລະຄຸນລັກສະນະຂອງ phenotype (ແລະການປ່ຽນແປງຂອງມັນ) ໃນລະຫວ່າງການຜະລິດແລະຄວາມແຕກຕ່າງຂອງຈຸລັງລໍາຕົ້ນເຫຼົ່ານີ້.The Countstar Rigel ຍັງມີປະໂຫຍດໃນການໄດ້ຮັບຂໍ້ມູນດ້ານສະລີລະວິທະຍາເພີ່ມເຕີມ, ສະຫນອງໃຫ້ໂດຍການບັນທຶກພາບທີ່ສົດໃສແລະ fluorescence ຖາວອນໃນລະຫວ່າງຂະບວນການທັງຫມົດຂອງການກວດສອບຄຸນນະພາບຂອງເຊນ.Countstar Rigel ສະຫນອງວິທີການໄວ, ຊັບຊ້ອນ, ແລະເຊື່ອຖືໄດ້ສໍາລັບການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຂອງຈຸລັງລໍາຕົ້ນ.
ວັດສະດຸ ແລະວິທີການ:
ຈຸລັງລໍາຕົ້ນ mesenchymal ທີ່ມາຈາກ Adipose (AdMSCs) ໄດ້ຖືກມອບໃຫ້ໂດຍອາຈານ Nianmin Qi, ການແກ້ໄຂການຍ້ອມສີ AO/PI (Shanghai RuiYu, CF002).ພູມຕ້ານທານ: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (ບໍລິສັດ BD).
AdMSCs ໄດ້ຖືກນໍາໄປລ້ຽງຢູ່ໃນ 37 ℃, 5% CO2 ຄວາມຊຸ່ມ incubator.ຍ່ອຍອາຫານດ້ວຍ trypsin ກ່ອນທີ່ຈະໃຊ້.
ຂັ້ນຕອນການເຮັດໃຫ້ເຄື່ອງຫມາຍ CD ໄດ້ຖືກປະຕິບັດຕາມຄູ່ມືຂອງພູມຕ້ານທານ.
ການກວດຫາເຄື່ອງໝາຍ CD ດ້ວຍ Countstar Rigel:
1. ຂັ້ນຕອນການນໍາໃຊ້ສີສັນຍານໄດ້ຖືກສ້າງຕັ້ງຂື້ນໂດຍການຕັ້ງຊ່ອງ PE ກັບຮູບພາບ fluorescence PE.
2. 3 ສະໜາມຖືກຍຶດຈາກແຕ່ລະຫ້ອງ.
3. ຫຼັງຈາກຮູບພາບແລະການວິເຄາະເບື້ອງຕົ້ນສໍາເລັດແລ້ວ, ກໍານົດຂອບເຂດ (ປະຕູບັນທຶກ) ສໍາລັບການຖ່າຍທອດທາງບວກແລະທາງລົບໄດ້ຖືກກໍານົດໂດຍຊອບແວ FCS.
ການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຂອງຈຸລັງລໍາຕົ້ນ
ຮູບຕໍ່ໄປນີ້ (ຮູບ 1) ສະແດງໃຫ້ເຫັນຂັ້ນຕອນຂອງ ການປິ່ນປົວດ້ວຍຈຸລັງລໍາຕົ້ນ .
ຮູບທີ 1: ຂັ້ນຕອນການປິ່ນປົວເຊລຕົ້ນ
ຜົນໄດ້ຮັບ:
ການກໍານົດຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ, ຄວາມເປັນໄປໄດ້, ເສັ້ນຜ່າສູນກາງ, ແລະການລວບລວມຂອງ AdMSCs.
ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງ AdMSCs ຖືກກໍານົດໂດຍ AO/PI, ຂັ້ນຕອນການສະຫມັກສອງສີໄດ້ຖືກສ້າງຂື້ນໂດຍການຕັ້ງຄ່າຊ່ອງສີຂຽວແລະຊ່ອງສີແດງເປັນຮູບພາບ AO ແລະ PI fluorescence, ບວກກັບຊ່ອງຫວ່າງ.ຮູບພາບຕົວຢ່າງໄດ້ສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 2.
ຮູບທີ 2. ຮູບພາບກ່ອນການຂົນສົ່ງ ແລະຫຼັງການຂົນສົ່ງຂອງ AdMSCs.A. ກ່ອນການຂົນສົ່ງ;ຮູບພາບຕົວແທນແມ່ນສະແດງໃຫ້ເຫັນ.B. ຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ;ຮູບພາບຕົວແທນແມ່ນສະແດງໃຫ້ເຫັນ.
ຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງ AdMSCs ມີການປ່ຽນແປງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງເມື່ອປຽບທຽບກັບກ່ອນການຂົນສົ່ງ.ຄວາມເປັນໄປໄດ້ກ່ອນການຂົນສົ່ງແມ່ນ 92%, ແຕ່ຫຼຸດລົງເຖິງ 71% ຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ.ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນສະແດງຢູ່ໃນຮູບ 3.
ຮູບທີ 3. ຜົນໄດ້ຮັບຄວາມເປັນໄປໄດ້ຂອງ AdMSCs (ກ່ອນການຂົນສົ່ງ ແລະຫຼັງການຂົນສົ່ງ)
ເສັ້ນຜ່າສູນກາງແລະການລວບລວມຍັງຖືກກໍານົດໂດຍ Countstar Rigel.ເສັ້ນຜ່າສູນກາງຂອງ AdMSCs ມີການປ່ຽນແປງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງເມື່ອປຽບທຽບກັບກ່ອນການຂົນສົ່ງ.ເສັ້ນຜ່າສູນກາງກ່ອນການຂົນສົ່ງແມ່ນ 19µm, ແຕ່ມັນເພີ່ມຂຶ້ນເປັນ 21µm ຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ.ການລວບລວມກ່ອນການຂົນສົ່ງແມ່ນ 20%, ແຕ່ມັນເພີ່ມຂຶ້ນເປັນ 25% ຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ.ຈາກຮູບພາບທີ່ຖືກຈັບໂດຍ Countstar Rigel, phenotype ຂອງ AdMSCs ໄດ້ມີການປ່ຽນແປງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ.ຜົນໄດ້ຮັບສະແດງໃຫ້ເຫັນໃນຮູບ 4.
ຮູບທີ 4: ເສັ້ນຜ່າສູນກາງ ແລະ ຜົນການລວບລວມ.A: ຮູບພາບຕົວແທນຂອງ AdMSCs, phenotype ຂອງ AdMSCs ມີການປ່ຽນແປງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ.B: ການລວບລວມກ່ອນການຂົນສົ່ງແມ່ນ 20%, ແຕ່ມັນເພີ່ມຂຶ້ນເປັນ 25% ຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ.C: ເສັ້ນຜ່າສູນກາງກ່ອນການຂົນສົ່ງແມ່ນ 19µm, ແຕ່ມັນເພີ່ມຂຶ້ນເປັນ 21µm ຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ.
ກໍານົດ immunophenotype ຂອງ AdMSCs ໂດຍ Countstar Rigel
immunophenotype ຂອງ AdMSCs ຖືກກໍານົດໂດຍ Countstar Rigel, AdMSCs ໄດ້ຖືກ incubated ກັບ antibody ທີ່ແຕກຕ່າງກັນຕາມລໍາດັບ (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).ຂັ້ນຕອນການສະຫມັກສີສັນຍານຖືກສ້າງຂື້ນໂດຍການຕັ້ງຊ່ອງສີຂຽວໃຫ້ກັບຮູບພາບ PE fluorescence, ບວກກັບພາກສະຫນາມທີ່ສົດໃສ.ການແບ່ງສ່ວນການອ້າງອີງຮູບພາບພາກສະຫນາມສົດໃສໄດ້ຖືກນໍາໃຊ້ເປັນຫນ້າກາກເພື່ອຕົວຢ່າງສັນຍານ fluorescence PE.ຜົນໄດ້ຮັບຂອງ CD105 ໄດ້ຖືກສະແດງ (ຮູບ 5).
ຮູບ 5: ຜົນໄດ້ຮັບ CD105 ຂອງ AdMSCs ຖືກກໍານົດໂດຍ Countstar Rigel.A: ການວິເຄາະດ້ານປະລິມານຂອງອັດຕາສ່ວນບວກຂອງ CD105 ໃນຕົວຢ່າງທີ່ແຕກຕ່າງກັນໂດຍຊອບແວ FCS express 5 plus.B: ຮູບພາບຄຸນນະພາບສູງສະຫນອງຂໍ້ມູນຂ່າວສານ morphological ເພີ່ມເຕີມ.C: ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ຖືກຕ້ອງຕາມຮູບຫຍໍ້ຂອງແຕ່ລະເຊນດຽວ, ເຄື່ອງມືຊອຟແວ FCS ໄດ້ແບ່ງຈຸລັງອອກເປັນກຸ່ມຕ່າງໆຕາມການສະແດງອອກຂອງທາດໂປຼຕີນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.
ຜົນໄດ້ຮັບຂອງພູມຕ້ານທານອື່ນໆໄດ້ຖືກສະແດງຢູ່ໃນຮູບທີ 6
ຮູບທີ 6: A: ຮູບພາບຕົວແທນຂອງ ASCs ທີ່ມີຮູບຊົງແບບ spindle ປົກກະຕິ.ບັນທຶກໂດຍກ້ອງຈຸລະທັດ OLYMPUS.ການຂະຫຍາຍຕົ້ນສະບັບ, (10x).B: ຄວາມແຕກຕ່າງຂອງ Adipogenic ຂອງ ASCs ແມ່ນຫຼັກຖານໂດຍ Ruthenium Red staining ສະແດງໃຫ້ເຫັນພື້ນທີ່ຂອງແຮ່ທາດ.ບັນທຶກໂດຍກ້ອງຈຸລະທັດ OLYMPUS.ການຂະຫຍາຍຕົ້ນສະບັບ (10x).C: Countstar FL characterization ຂອງ ASCs.
ສະຫຼຸບ:
Countstar FL ສາມາດຕິດຕາມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ, ຄວາມເປັນໄປໄດ້, ແລະລັກສະນະ phenotype (ແລະການປ່ຽນແປງຂອງມັນ) ໃນລະຫວ່າງການຜະລິດແລະຄວາມແຕກຕ່າງຂອງຈຸລັງລໍາຕົ້ນເຫຼົ່ານີ້.FCS ສະແດງໃຫ້ເຫັນຫນ້າທີ່ໃນການທົບທວນຄືນທຸກຫ້ອງສັນຍານ, ການກວດສອບຂໍ້ມູນໂດຍຜ່ານຮູບພາບ.ຜູ້ໃຊ້ຍັງສາມາດມີຄວາມຫມັ້ນໃຈໃນການປະຕິບັດການທົດລອງຕໍ່ໄປໂດຍອີງໃສ່ຜົນໄດ້ຮັບ Countstar Rigel.Countstar Rigel ສະຫນອງວິທີການໄວ, ຊັບຊ້ອນ, ແລະເຊື່ອຖືໄດ້ສໍາລັບການຄວບຄຸມຄຸນນະພາບຂອງຈຸລັງລໍາຕົ້ນ.
