ການນັບ AOPI Dual-fluoresces ແມ່ນປະເພດການວິເຄາະທີ່ໃຊ້ສໍາລັບການກວດສອບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງເຊນແລະຄວາມເປັນໄປໄດ້.ການແກ້ໄຂແມ່ນການປະສົມປະສານຂອງສີສົ້ມ acridine (ການ stain ອາຊິດ nucleic ສີຂຽວ-fluorescent) ແລະ propidium iodide (ຮອຍເປື້ອນອາຊິດ nucleic ສີແດງ fluorescent).Propidium iodide (PI) ແມ່ນສີຍ້ອມການຍົກເວັ້ນເຍື່ອທີ່ພຽງແຕ່ເຂົ້າໄປໃນຈຸລັງທີ່ມີເຍື່ອທີ່ຖືກທໍາລາຍ, ໃນຂະນະທີ່ສີສົ້ມ acridine ສາມາດເຂົ້າໄປໃນຈຸລັງທັງຫມົດໃນປະຊາກອນ.ເມື່ອສີຍ້ອມທັງສອງມີຢູ່ໃນນິວເຄລຍ, propidium iodide ເຮັດໃຫ້ເກີດການຫຼຸດລົງຂອງ fluorescence ສີສົ້ມ acridine ໂດຍການໂອນພະລັງງານ fluorescence resonance (FRET).ດັ່ງນັ້ນ, ຈຸລັງ nucleated ທີ່ມີເຍື່ອ intact stain ສີຂຽວ fluorescent ແລະຖືກນັບວ່າເປັນຈຸລັງທີ່ມີຊີວິດ, ໃນຂະນະທີ່ຈຸລັງ nucleated ທີ່ມີເຍື່ອປະນີປະນອມພຽງແຕ່ stain ສີແດງ fluorescent ແລະຖືກນັບວ່າເປັນຕາຍໃນເວລາທີ່ການນໍາໃຊ້ລະບົບ Countstar® FL.ວັດສະດຸທີ່ບໍ່ມີທາດນິວເຄລຍ ເຊັ່ນ: ເມັດເລືອດແດງ, ເມັດເລືອດ ແລະສິ່ງເສດເຫຼືອທີ່ບໍ່ເປັນທາດ fluoresce ແລະຖືກລະເລີຍໂດຍຊອບແວ Countstar® FL.
ຂະບວນການຂອງການປິ່ນປົວດ້ວຍຈຸລັງລໍາຕົ້ນ
ຮູບທີ 4 ການຕິດຕາມຄວາມເປັນໄປໄດ້ແລະການນັບເຊນຂອງ mesenchymal stem cells (MSCs) ສໍາລັບການນໍາໃຊ້ໃນການປິ່ນປົວເຊນ.
ກໍານົດຄວາມເປັນໄປໄດ້ MSC ໂດຍ AO/PI ແລະ Trypan Blue assay
ຮູບທີ 2. A. ຮູບພາບຂອງ MSC stained ໂດຍ AO/PI ແລະ Trypan Blue;2. ການປຽບທຽບ AO/PI ແລະ Trypan blue ຜົນໄດ້ຮັບກ່ອນ ແລະຫຼັງການຂົນສົ່ງ.
ການປ່ຽນແປງດັດຊະນີການສະທ້ອນຂອງເຊນ, ຮອຍເປື້ອນຂອງ Trypan Blue ແມ່ນບໍ່ຈະແຈ້ງ, ມັນເປັນການຍາກທີ່ຈະກໍານົດຄວາມເປັນໄປໄດ້ຫຼັງຈາກການຂົນສົ່ງ.ໃນຂະນະທີ່ fluorescence ສອງສີອະນຸຍາດໃຫ້ສໍາລັບການ staining ຂອງຈຸລັງ nucleated ທີ່ມີຊີວິດແລະຕາຍ, ສ້າງຜົນໄດ້ຮັບທີ່ຖືກຕ້ອງເຖິງແມ່ນວ່າຢູ່ໃນທີ່ປະທັບຂອງ debris, platelets, ແລະເມັດເລືອດແດງ.
