Paraugu, kas satur šūnas suspensijā, sajauc ar tripāna zilo krāsvielu, pēc tam ievelk Countstar Chamber Slide, ko analizē ar Countstar Automated Cell Counter.Pamatojoties uz klasisko tripāna zilo šūnu skaitīšanas principu, Countstar instrumenti integrē progresīvu optisko attēlveidošanas tehnoloģiju, viedo attēlu atpazīšanas tehnoloģiju un jaudīgus programmatūras algoritmus, lai ne tikai nodrošinātu šūnu koncentrāciju un dzīvotspēju, bet arī sniegtu informāciju par šūnu koncentrāciju, dzīvotspēju, agregācijas ātrumu, apaļumu. , un diametra sadalījums tikai ar vienu piegājienu.
Apkopotā šūnu analīze
3. attēls Apkopoto šūnu skaitīšana.
A. Šūnas parauga attēls;
B. Šūnas parauga attēls ar identifikācijas zīmi, ko nodrošina programmatūra Countstar BioTech.(Zaļš aplis: dzīva šūna, dzeltenais aplis: mirušā šūna, sarkanais aplis: apkopotā šūna).
C. Apkopotā histogramma
Dažas primārās šūnas vai subkultūras šūnas ir pakļautas agregācijai sliktas kultūras stāvokļa vai pārmērīgas gremošanas gadījumā, tādējādi radot lielas grūtības šūnu skaitīšanā.Izmantojot agregācijas kalibrēšanas funkciju, Countstar var veikt agregāciju stimulēšanas aprēķinus, lai nodrošinātu precīzu šūnu skaitīšanu un iegūtu agregācijas ātrumu un agregācijas histogrammu, tādējādi nodrošinot eksperimenta dalībniekiem pamatu šūnu stāvokļa noteikšanai.
Šūnu augšanas uzraudzība
4. attēls Šūnu augšanas līkne.
Šūnu augšanas līkne ir izplatīta metode šūnu skaita absolūtā pieauguma mērīšanai, svarīgs rādītājs šūnu koncentrācijas noteikšanai un viens no šūnu bioloģisko pamatīpašību kultivēšanas pamatparametriem.Lai precīzi aprakstītu šūnu skaita dinamiskās izmaiņas visa procesa garumā, tipisko augšanas līkni var iedalīt 4 daļās: inkubācijas periods ar lēnu augšanu;eksponenciālas augšanas fāze ar lielu slīpumu, plato fāze un lejupslīdes periods.Šūnu augšanas līkni var iegūt, attēlojot dzīvo šūnu skaitu (10 000/ml) attiecībā pret kultivēšanas laiku (h vai d).
Šūnu koncentrācijas un dzīvotspējas mērīšana
1. attēls Attēlus uzņēma Countstar BioTech, jo šūnas (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 un MDCK) suspensijā tika iekrāsotas attiecīgi ar Trypan Blue.
Countstar ir piemērojams šūnām ar diametru no 5 līdz 180 um, piemēram, zīdītāju šūnām, kukaiņu šūnām un dažiem planktoniem.
Šūnas izmēra mērīšana
2. attēls CHO šūnu šūnu izmēra mērīšana pirms un pēc plazmīdas transfekcijas.
A. CHO šūnu suspensijas attēli, kas iekrāsoti ar tripānzilu pirms un pēc plazmīdas transfekcijas.
B. CHO šūnu izmēra histogrammas salīdzinājums pirms un pēc plazmīdas transfekcijas.
Šūnu izmēra izmaiņas ir galvenā iezīme, un to parasti mēra šūnu izpētē.Parasti to mēra šajos eksperimentos: šūnu transfekcija, zāļu tests un šūnu aktivācijas testi.Countstar nodrošina statistiskos morfoloģijas datus, piemēram, šūnu izmērus, 20 sekunžu laikā.
Countstar automatizētais šūnu skaitītājs var sniegt šūnu morfoloģiskos datus, tostarp apļveida un diametra histogrammas.
