Mezenhimālās cilmes šūnas ir pluripotentu cilmes šūnu apakškopa, ko var izolēt no mezodermas.Pateicoties pašreplikācijas atjaunošanai un daudzvirzienu diferenciācijas īpašībām, tiem ir augsts potenciāls dažādām terapijām medicīnā.Mezenhimālajām cilmes šūnām ir unikāls imūnfenotips un imūnregulācijas spēja.Tāpēc mezenhimālās cilmes šūnas jau tiek plaši izmantotas cilmes šūnu transplantācijā, audu inženierijā un orgānu transplantācijā.Papildus šiem lietojumiem tie tiek izmantoti kā ideāls rīks audu inženierijā kā sējšūnas vairākos pamata un klīniskajos pētījumos.
Countstar Rigel var uzraudzīt koncentrāciju, dzīvotspēju, apoptozes analīzi un fenotipu īpašības (un to izmaiņas) šo cilmes šūnu ražošanas un diferenciācijas laikā.Countstar Rigel priekšrocība ir arī papildu morfoloģiskās informācijas iegūšana, ko nodrošina pastāvīgs spilgts lauks un uz fluorescenci balstīti attēlu ieraksti visa šūnu kvalitātes uzraudzības procesa laikā.Countstar Rigel piedāvā ātru, izsmalcinātu un uzticamu metodi cilmes šūnu kvalitātes kontrolei.
MSC dzīvotspējas uzraudzība reģeneratīvajā medicīnā
1. attēls. Mezenhimālo cilmes šūnu (MSC) dzīvotspējas un šūnu skaita uzraudzība izmantošanai šūnu terapijā
Cilmes šūnas ir viena no daudzsološākajām ārstēšanas metodēm reģeneratīvajā šūnu terapijā.No MSC ievākšanas līdz apstrādei ir svarīgi saglabāt augstu cilmes šūnu dzīvotspēju visos cilmes šūnu ražošanas posmos (1. attēls).Countstar cilmes šūnu skaitītājs uzrauga cilmes šūnu dzīvotspēju un koncentrāciju, lai tam būtu izšķiroša nozīme kvalitātes kontrolē.
MSC morfoloģisko izmaiņu uzraudzība pēc transportēšanas
Diametru un agregāciju noteica arī Countstar Rigel.AdMSC diametrs tika krasi mainīts pēc transportēšanas, salīdzinot ar pirms transportēšanas.Diametrs pirms transportēšanas bija 19 µm, bet pēc transportēšanas tas palielinājās līdz 21 µm.Pirms transportēšanas summējums bija 20%, bet pēc transportēšanas tas pieauga līdz 25%.No attēliem, ko uzņēma Countstar Rigel, AdMSC fenotips pēc transportēšanas tika krasi mainīts.Rezultāti tika parādīti 3. attēlā.
AdMSC identifikācija šūnu fenotipā
Pašlaik minimālās standarta identifikācijas pārbaudes procedūras uzraudzīto MSC kvalitātes nodrošināšanai ir uzskaitītas Starptautiskās šūnu terapijas biedrības (ISCT) paziņojumā, kas definēts jau 2006. gadā.
Ātra apoptozes noteikšana MSC ar FITC konjugēto aneksīnu-V un 7-ADD ievadi
Šūnu apoptozi var noteikt ar FITC konjugētu aneksīnu-V un 7-ADD.Veselās šūnās PS parasti atrodama tikai plazmas membrānas intracelulārajā brošūrā, bet agrīnas apoptozes laikā tiek zaudēta membrānas asimetrija un PS pārceļas uz ārējo brošūru.
6. attēls Apoptozes noteikšana MSC, ko veicis Countstar Rigel
A. Apoptozes noteikšanas fluorescences attēla vizuāla pārbaude MSC
B. Apoptozes izkliedes diagrammas MSC ar FCS ekspress palīdzību
C. Šūnu populācijas procentuālais daudzums, pamatojoties uz % normālu, % apoptotisku un % nekrotisku/ļoti vēlīnā stadijas apoptotisko šūnu.
