Ny rafitra Countstar dia manambatra ny cytometer sary sy ny kaontera sela ho fitaovana iray ambony dabilio.Ity rafitra fakan-tsarimihetsika cellules entin'ny fampiharana ity dia manome vahaolana tokana ho an'ny fikarohana sela homamiadana, ao anatin'izany ny fanisana sela, ny fahavelomana (AO/PI, manga trypan), ny apoptose (Annexin V-FITC/PI), ny sela. cycle (PI), ary GFP/RFP transfection.
saro-takarina
Iray amin'ireo antony mahafaty eran-tany ny homamiadana, ary zava-dehibe ny fivoaran'ny fomba fitsaboana homamiadana vaovao.Ny sela homamiadana no fototry ny fikarohana momba ny homamiadana, mila tombana ny fampahalalana isan-karazany avy amin'ny sela homamiadana.Mila famakafakana sela haingana, azo itokisana, tsotra ary amin'ny antsipiriany ity faritra fikarohana ity.Ny rafitra Countstar dia manome sehatra vahaolana tsotra ho an'ny famakafakana sela homamiadana.
Fandalinana ny Apoptosis sela homamiadana nataon'i Countstar Rigel
Ny fitiliana apoptose dia matetika ampiasaina any amin'ny laboratoara maro ho an'ny tanjona isan-karazany manomboka amin'ny fanombanana ny fahasalaman'ny kolontsaina sela ka hatramin'ny fanombanana ny poizina amin'ny fitambaran-kitapo.
Apoptosis assay dia karazana ampiasaina hamaritana ny isan-jaton'ny apoptose amin'ny sela amin'ny fomba fandokoana Annexin V-FITC/PI.Ny Annexin V dia mifamatotra amin'ny phosphatidylserine (PS) miaraka amin'ny sela apoptose aloha na sela necrosis.Ny PI dia miditra amin'ny sela necrotic / tena tara loatra.(sary 1)
A: Apoptosis aloha Annexin V (+), PI (-)
B: Late apoptose Annexin V (+), PI (+)
Figure1: antsipiriany lehibe momba ny sary Countstar Rigel (5 x magnification) amin'ny sela 293, voatsabo miaraka amin'ny Annexin V FITC sy PI
Famakafakana tsingerin'ny sela ny sela homamiadana
Ny tsingerin'ny sela na ny tsingerin'ny fizarazarana sela dia andian-javatra mitranga ao amin'ny sela iray mitondra mankany amin'ny fizarazarany sy ny fampitomboana ny ADN (replication ADN) mba hamokarana sela zanaka vavy roa.Ao amin'ny sela misy nokleary, toy ny amin'ny eukaryotes, ny tsingerin'ny sela dia mizara ho vanim-potoana telo: interphase, ny mitotic (M) phase, ary cytokinesis.Propidium iodide (PI) dia loko fandokoana nokleary izay matetika ampiasaina handrefesana ny tsingerin'ny sela.Satria tsy afaka miditra amin'ny sela velona ny loko, dia raikitra amin'ny ethanol ny sela alohan'ny fandotoana.Ny sela rehetra dia voaloto avy eo.Ny sela miomana amin'ny fizarazarana dia ahitana ADN mihabetsaka ary mampiseho ny fluorescence mihamitombo.Ny fahasamihafana amin'ny hamafin'ny fluorescence dia ampiasaina hamaritana ny isan-jaton'ny sela isaky ny dingana amin'ny tsingerin'ny sela.Afaka maka sary ny Countstar ary haseho amin'ny rindrambaiko FCS express ny valiny.(sary 2)
Figure 2: MCF-7 (A) sy 293T (B) dia voapoizina tamin'ny Kit Detection Cell Cycle miaraka amin'ny PI, ny valiny dia nofaritan'ny Countstar Rigel, ary nodinihina tamin'ny FCS Express.
Fahavitrihana sy Famantarana ny fifindran'ny GFP ao amin'ny sela
Mandritra ny bioprocess, ny GFP dia matetika ampiasaina mba hitambatra amin'ny proteinina recombinant ho famantarana.Famaritana ny fluorescent GFP dia afaka maneho ny fanehoana proteinina kendrena.Countstar Rigel dia manolotra fitiliana haingana sy tsotra amin'ny fitiliana ny fifindran'ny GFP ary koa ny fahavelomana.Ny sela dia nolokoina tamin'ny Propidium iodide (PI) sy Hoechst 33342 mba hamaritana ny isan'ny sela maty sy ny isan'ny sela.Countstar Rigel dia manolotra fomba haingana sy be dia be amin'ny fanombanana ny fahombiazan'ny fanehoana GFP sy ny fahavelomana amin'ny fotoana iray ihany.(sary 4)
Sary 4: Ny cellules dia hita amin'ny fampiasana Hoechst 33342 (manga) ary azo faritana mora foana ny isan-jaton'ny sela maneho ny GFP (maitso).Ny sela tsy azo iainana dia voaloton'ny propidium iodide (PI; mena).
Viability sy ny isan'ny sela
Ny fanisana AO / PI Dual-fluoresces dia ny karazana assay ampiasaina amin'ny fitadiavana ny fifantohan'ny sela, ny viability.Izy io dia mizara ho fanisana tsipika sela sy fanisana sela voalohany araka ny karazana sela samihafa.Ny vahaolana dia misy fitambaran'ny tasy asidra nukleika maitso-fluorescent, voasary acridine, ary ny tasy asidra nukleika mena, propidium iodide.Ny propidium iodide dia fandokoana fandokoana manify izay miditra ao amin'ny sela misy membranes simba ihany raha ny voasary acridine dia miditra amin'ny sela rehetra amin'ny mponina iray.Rehefa misy loko roa ao amin'ny nucleus, ny propidium iodide dia miteraka fampihenana ny fluorescence orange acridine amin'ny alàlan'ny famindrana angovo azo avy amin'ny fluorescence resonance (FRET).Vokatr'izany, ny sela nokleary miaraka amin'ny fonon-tsela tsy misy dikany dia mandoto maitso maitso ary isaina ho velona, fa ny sela nokleary miaraka amin'ny membrane simba ihany no mandoto mena ary isaina ho maty rehefa mampiasa ny rafitra Countstar Rigel.Ny fitaovana tsy misy nokleary toy ny sela mena, ny platelets ary ny potipoti-javatra dia tsy misy fluoresce ary tsy noraharahian'ny rindrambaiko Countstar Rigel.(sary 5)
Figure 5: Countstar dia nanatsara ny fomba fandokoana roa-fluorescence ho an'ny famaritana tsotra sy marina momba ny fifantohana sy ny fahavelomana PBMC.Ny santionany voaloto amin'ny AO/PI dia azo dinihina amin'ny Counstar Rigel
