Abstract: Ny cellule stem mesenchymal dia ampahany amin'ny cellule stem pluripotent izay azo atokana amin'ny mesoderme.Miaraka amin'ny fanavaozana ny famerenan-tenany sy ny toetra mampiavaka azy amin'ny lafiny maro, dia manana hery lehibe amin'ny fitsaboana isan-karazany amin'ny fitsaboana izy ireo.Ny cellule stem mesenchymal dia manana phenotype immune tsy manam-paharoa sy fahaizana mifehy ny hery fiarovana.Noho izany, ny cellule stem mesenchymal dia efa ampiasaina betsaka amin'ny famindrana sela, ny engineering tissue ary ny transplantation taova.Ary ankoatr'ireo fampiharana ireo dia ampiasaina ho fitaovana tsara indrindra amin'ny injeniera amin'ny sela izy ireo ho sela mpamboly amin'ny andiam-panandramana fikarohana fototra sy klinika.Hatramin'izao, tsy misy fomba sy fenitra ekena ho an'ny fanaraha-maso ny kalitaon'ny sela mesenchymal.Ny Countstar Rigel dia afaka manara-maso ny fifantohana, ny viability ary ny toetran'ny phenotype (sy ny fiovan'izy ireo) mandritra ny famokarana sy ny fanavahana ireo sela stem ireo.Ny Countstar Rigel dia manana tombony ihany koa amin'ny fahazoana fampahalalana momba ny morphologique fanampiny, omen'ny fandraketam-tsary miorina amin'ny hazavana maharitra sy ny fluorescence mandritra ny dingana manontolo amin'ny fanaraha-maso ny kalitaon'ny sela.Ny Countstar Rigel dia manolotra fomba haingana, be pitsiny ary azo itokisana amin'ny fanaraha-maso ny kalitaon'ny cellule stem.
Fitaovana sy fomba fiasa:
Ny sela mesenchymal derived adipose (AdMSCs) dia nomen'ny Profesora Nianmin Qi, vahaolana fandokoana AO / PI (Shanghai RuiYu, CF002).Antibody: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (BD Company).
AdMSCs dia novolavolaina tao amin'ny 37 ℃, 5% CO2 humidified incubator.Levonina miaraka amin'ny trypsin alohan'ny hampiasana azy.
Ny fomba fandokoana CD marker dia narahina ho boky torolalana momba ny antibody.
Fikarohana marika CD miaraka amin'i Countstar Rigel:
1. Ny fomba fampiharana loko famantarana dia noforonina tamin'ny fametrahana ny fantsona PE amin'ny sary PE fluorescence.
2. Tany 3 no nalaina avy tamin’ny efitrano tsirairay.
3. Rehefa vita ny sary sy ny fanadihadiana voalohany, dia napetraky ny rindrambaiko FCS ny tokonam-baravarana (vavahadin'ny log) ho an'ny fifindrana tsara sy ratsy.
Fanaraha-maso ny kalitaon'ny sela stem
Ity sary manaraka ity (sary 1) dia mampiseho ny fomba fiasan'ny fitsaboana sela stem .
Sary 1: Ny fomba fitsaboana amin'ny fitsaboana sela
Vokatra:
Famaritana ny fifantohana, ny viability, ny savaivony ary ny fitambaran'ny AdMSC.
Ny fahafahan'ny AdMSCs dia nofaritana tamin'ny AO/PI, Ny fomba fampiharana roa loko dia noforonina tamin'ny fametrahana fantsona maitso sy mena amin'ny sary AO sy PI fluorescence, miampy saha mamirapiratra.Ny sary ohatra dia aseho amin'ny sary 2.
Sary 2. Sarin'ny alohan'ny fitaterana sy aorian'ny fitaterana ny AdMSCs.A. Alohan'ny fitaterana;sary maneho hevitra no aseho.B. Aorian'ny fitaterana;sary maneho hevitra no aseho.
Ny fahafahan'ny AdMSC dia niova tanteraka taorian'ny fitaterana raha oharina tamin'ny talohan'ny fitaterana.92% ny viability alohan'ny fitaterana, saingy nihena ho 71% izany taorian'ny fitaterana.Ny vokatra dia aseho amin'ny sary 3.
Sary 3. Ny voka-dratsin'ny AdMSC (Talohan'ny fitaterana sy aorian'ny fitaterana)
Ny savaivony sy ny fanangonana dia nofaritan'i Countstar Rigel ihany koa.Ny savaivony AdMSCs dia niova tanteraka taorian'ny fitaterana raha oharina amin'ny talohan'ny fitaterana.Ny savaivony talohan'ny fitaterana dia 19µm, saingy nitombo ho 21µm taorian'ny fitaterana.Ny fitambaran'ny alohan'ny fitaterana dia 20%, saingy nitombo ho 25% izany taorian'ny fitaterana.Avy amin'ny sary nalain'i Countstar Rigel, niova tanteraka ny endriky ny AdMSC taorian'ny fitaterana.Ny vokatra dia aseho amin'ny sary 4.
Sary 4: Ny savaivony sy ny vokatra aggregation.A: Ny sary solontenan'ny AdMSC, ny endriky ny AdMSC dia niova tanteraka taorian'ny fitaterana.B: 20% ny fitambarana alohan'ny fitaterana, saingy nitombo ho 25% izany taorian'ny fitaterana.C: Ny savaivony talohan'ny fitaterana dia 19µm, saingy nitombo ho 21µm izany taorian'ny fitaterana.
Famaritana ny immunophenotype an'ny AdMSC nataon'i Countstar Rigel
Ny immunophenotype an'ny AdMSCs dia nofaritan'ny Countstar Rigel, AdMSCs dia niparitaka tamin'ny antibody samihafa (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).Ny fomba fampiharana loko famantarana dia noforonina tamin'ny fametrahana fantsona maitso ho an'ny sary PE fluorescence, miampy saha mamirapiratra.Ny fizarana reference sarin'ny saha mamirapiratra dia nampiharina ho saron-tava hanandrana ny famantarana ny fluorescence PE.Ny valin'ny CD105 dia naseho (sary 5).
Sary 5: Ny valin'ny CD105 an'ny AdMSC dia nofaritan'i Countstar Rigel.A: Famakafakana ny isan-jaton'ny CD105 amin'ny santionany samihafa amin'ny alàlan'ny rindrambaiko FCS express 5 plus.B: Ny sary avo lenta dia manome fampahalalana momba ny morphologique fanampiny.C: Valiny voamarina tamin'ny alalan'ny thumbnail isaky ny sela tsirairay, ny fitaovana rindrambaiko FCS dia nizara ireo sela ho vondrona samihafa araka ny fitenin'ny proteinina samihafa.
Ny valin'ny antibody hafa dia aseho amin'ny sary 6
Sary 6: A: Sarin'ny solontenan'ny ASC manana endrika miendrika spindle mahazatra.Nalaina tamin'ny microscope OLYMPUS.Fampitomboana tany am-boalohany, (10x).B: Adipogenic fanavahana ASCs dia voaporofo amin'ny Ruthenium mena staining mampiseho faritra mineralization.Nalaina tamin'ny microscope OLYMPUS.Fanabeazana tany am-boalohany (10x).C: Countstar FL toetra mampiavaka ny ASCs.
Famintinana:
Ny Countstar FL dia afaka manara-maso ny fifantohana, ny viability ary ny toetran'ny phenotype (sy ny fiovan'izy ireo) mandritra ny famokarana sy ny fanavahana ireo sela stem ireo.Ny FCS express dia manome ny fiasa hamerenana ny sela famantarana rehetra, hanamarina ny angona amin'ny alàlan'ny sary.Ny mpampiasa dia afaka manana fahatokiana amin'ny fanatanterahana ny andrana manaraka mifototra amin'ny valin'ny Countstar Rigel.Ny Countstar Rigel dia manolotra fomba haingana, be pitsiny ary azo itokisana amin'ny fanaraha-maso ny kalitaon'ny cellule stem.
