Protocol Experimental
Ny % cytotoxicity dia kajy amin'ny equation etsy ambany.
Cytotoxicity % = (Isan'ny fanaraha-maso mivantana - Isan'ny voatsabo) / Isan'ny fanaraha-maso mivantana × 100
Amin'ny alàlan'ny fametahana ireo sela fivontosana kendrena miaraka amin'ny calcein AM tsy misy poizina, tsy radioaktifa na mamindra miaraka amin'ny GFP, dia azontsika atao ny manara-maso ny famonoana ny sela fivontosana amin'ny sela CAR-T.Raha ny sela homamiadana kendrena velona dia hasiana marika amin'ny calcein maitso AM na GFP, ny sela maty dia tsy afaka mitazona ny loko maitso.Hoechst 33342 dia ampiasaina amin'ny fandotoana ny sela rehetra (sela T na sela fivontosana), raha tsy izany, ny sela fivontosana kendrena dia azo voaloto amin'ny calcein AM mifatotra amin'ny membrane, ny PI dia ampiasaina amin'ny fandotoana ny sela maty (sela T na sela tumor).Ity paikady fandokoana ity dia ahafahana manavaka ireo sela samihafa.
E: T ratio miankina amin'ny cytotoxicity K562
Ny ohatra Hoechst 33342, CFSE, PI fluorescent sary dia ny K562 kendrena sela amin'ny t = 3 ora.
Ny sary fluorescent vokatr'izany dia nampiseho fitomboan'ny sela Hoechst+CFSE+PI+ Target rehefa nitombo ny tahan'ny E: T.