Примерок што содржи клетки во суспензија се меша со трипан сина боја, а потоа се вовлекува во слајдот на комората Countstar, анализиран со Countstar Automated Cell Counter.Врз основа на класичниот принцип на броење на трипан сини ќелии, инструментите на Countstar интегрираат напредна технологија за оптичко снимање, интелигентна технологија за препознавање слики и моќни софтверски алгоритми за не само да ја обезбедат концентрацијата и одржливоста на клетката, туку и да обезбедат информации за концентрацијата на клетките, одржливоста, стапката на агрегација, заобленоста , и дистрибуција на дијаметар со само едно возење.
Агрегирана клеточна анализа
Слика 3 Броење на агрегирани клетки.
А. Слика на примерок од мобилен;
Б. Слика на примерок од клетки со ознака за идентификација од софтверот Countstar BioTech.(Зелен круг: жива ќелија, жолт круг: мртва ќелија, црвен круг: збирна ќелија).
В. Агрегиран хистограм
Некои примарни клетки или клетки на субкултурата се склони кон агрегација при лоша состојба на културата или прекумерно варење, што предизвикува големи тешкотии во броењето на клетките.Со функцијата за калибрација на агрегација, Countstar може да реализира пресметување на стимулација на агрегации за да обезбеди точно броење на клетките и да ја добие стапката на агрегација и хистограмот на агрегација, со што ќе обезбеди основа за експериментаторите да ја проценат состојбата на клетките.
Следење на растот на клетките
Слика 4 Крива на раст на клетките.
Кривата на клеточен раст е вообичаен метод за мерење на апсолутниот раст на клеточниот број, важен индикатор за одредување на клеточната концентрација и еден од основните параметри за култура на основните биолошки својства на клетките.Со цел точно да се опише динамичната промена на бројот на клетки во текот на целиот процес, типичната крива на раст може да се подели на 4 дела: период на инкубација со бавен раст;Фаза на експоненцијален раст со голем наклон, фаза на плато и период на опаѓање.Кривата на раст на клетките може да се добие со исцртување на бројот на живи клетки (10'000/mL) во однос на времето на култура (ч или г).
Мерење на клеточната концентрација и одржливост
Слика 1.
Countstar е применлив за клетки со дијаметар помеѓу 5-180um, како клетка на цицачи, клетка од инсекти и некои планктони.
Мерење на големината на ќелијата
Слика 2 Мерење на големината на клетките на CHO клетките пред и по плазмидната трансфекција.
А. Слики од суспензија на CHO клетки обоени со трипан сино пред и по плазмидната трансфекција.
Б. Споредба на хистограмот на големината на CHO-клетката пред и по плазмидната трансфекција.
Промената на големината на клетките е клучна карактеристика и вообичаено се мери во истражувањето на клетките.Нормално, тоа ќе се мери во овие експерименти: клеточна трансфекција, тест за лекови и анализи за активирање на клетките.Countstar обезбедува статистички морфолошки податоци, како што се големини на клетките, во рок од 20 секунди.
Автоматскиот бројач на ќелии Countstar може да даде морфолошки податоци за клетките, вклучувајќи хистограми за кружност и дијаметар.
