AOPI ഡ്യുവൽ ഫ്ലൂറസസ് കൗണ്ടിംഗ് എന്നത് സെൽ കോൺസൺട്രേഷനും പ്രവർത്തനക്ഷമതയും കണ്ടുപിടിക്കാൻ ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു അസ്സേ തരം ആണ്.അക്രിഡൈൻ ഓറഞ്ച് (പച്ച ഫ്ലൂറസെന്റ് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് സ്റ്റെയിൻ), പ്രൊപിഡിയം അയഡൈഡ് (ചുവന്ന ഫ്ലൂറസെന്റ് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് സ്റ്റെയിൻ) എന്നിവയുടെ സംയോജനമാണ് പരിഹാരം.പ്രോപ്പിഡിയം അയഡൈഡ് (PI) ഒരു മെംബ്രൻ ഒഴിവാക്കൽ ചായമാണ്, അത് വിട്ടുവീഴ്ച ചെയ്ത ചർമ്മങ്ങളുള്ള കോശങ്ങളിലേക്ക് മാത്രം പ്രവേശിക്കുന്നു, അതേസമയം അക്രിഡിൻ ഓറഞ്ചിന് ഒരു ജനസംഖ്യയിലെ എല്ലാ കോശങ്ങളിലും തുളച്ചുകയറാൻ കഴിയും.രണ്ട് ചായങ്ങളും ന്യൂക്ലിയസിൽ ഉള്ളപ്പോൾ, ഫ്ലൂറസെൻസ് റിസോണൻസ് എനർജി ട്രാൻസ്ഫർ (FRET) വഴി പ്രൊപിഡിയം അയോഡൈഡ് അക്രിഡൈൻ ഓറഞ്ച് ഫ്ലൂറസെൻസ് കുറയ്ക്കുന്നു.തൽഫലമായി, കേടുപാടുകൾ സംഭവിക്കാത്ത മെംബ്രണുകളുള്ള ന്യൂക്ലിയേറ്റഡ് സെല്ലുകൾ ഫ്ലൂറസെന്റ് പച്ച നിറം നൽകുകയും ലൈവായി കണക്കാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു, അതേസമയം വിട്ടുവീഴ്ച ചെയ്ത ചർമ്മങ്ങളുള്ള ന്യൂക്ലിയേറ്റഡ് സെല്ലുകൾ ഫ്ലൂറസെന്റ് ചുവപ്പ് മാത്രം പാടുകയും Countstar® FL സിസ്റ്റം ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ മരിച്ചതായി കണക്കാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ, പ്ലേറ്റ്ലെറ്റുകൾ, അവശിഷ്ടങ്ങൾ എന്നിവ പോലുള്ള ന്യൂക്ലിയേറ്റഡ് അല്ലാത്ത വസ്തുക്കൾ ഫ്ലൂറസ് ചെയ്യുന്നില്ല, അവ Countstar® FL സോഫ്റ്റ്വെയർ അവഗണിക്കുന്നു.
സ്റ്റെം സെൽ തെറാപ്പി പ്രക്രിയ
ചിത്രം 4 സെൽ തെറാപ്പികളിലെ ഉപയോഗത്തിനായി മെസെൻചൈമൽ സ്റ്റെം സെല്ലുകളുടെ (എംഎസ്സി) പ്രവർത്തനക്ഷമതയും കോശങ്ങളുടെ എണ്ണവും നിരീക്ഷിക്കുന്നു.
എഒ/പിഐ, ട്രിപാൻ ബ്ലൂ അസ്സെ എന്നിവ വഴി എംഎസ്സി പ്രവർത്തനക്ഷമത നിർണ്ണയിക്കുക
ചിത്രം 2. A. AO/PI, ട്രിപാൻ ബ്ലൂ എന്നിവയാൽ മലിനമായ MSC യുടെ ചിത്രം;2. ഗതാഗതത്തിന് മുമ്പും ശേഷവും AO/PI, ട്രിപാൻ നീല ഫലം എന്നിവയുടെ താരതമ്യം.
സെൽ റിഫ്രാക്റ്റീവ് ഇൻഡക്സ് മാറുന്നു, ട്രൈപാൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിനിംഗ് അത്ര വ്യക്തമല്ല, ഗതാഗതത്തിനു ശേഷമുള്ള പ്രവർത്തനക്ഷമത നിർണ്ണയിക്കാൻ പ്രയാസമാണ്.ഡ്യുവൽ കളർ ഫ്ലൂറസെൻസ് ജീവനുള്ളതും നിർജ്ജീവവുമായ ന്യൂക്ലിയേറ്റഡ് കോശങ്ങളെ കളങ്കപ്പെടുത്താൻ അനുവദിക്കുമ്പോൾ, അവശിഷ്ടങ്ങൾ, പ്ലേറ്റ്ലെറ്റുകൾ, ചുവന്ന രക്താണുക്കൾ എന്നിവയുടെ സാന്നിധ്യത്തിൽ പോലും കൃത്യമായ പ്രവർത്തനക്ഷമത സൃഷ്ടിക്കുന്നു.