പരീക്ഷണാത്മക പ്രോട്ടോക്കോൾ
സൈറ്റോടോക്സിസിറ്റി % താഴെയുള്ള സമവാക്യം ഉപയോഗിച്ച് കണക്കാക്കുന്നു.
സൈറ്റോടോക്സിസിറ്റി % = (നിയന്ത്രണത്തിന്റെ തത്സമയ എണ്ണം - ചികിത്സയുടെ തത്സമയ എണ്ണം) / നിയന്ത്രണത്തിന്റെ തത്സമയ എണ്ണം × 100
ടാർഗെറ്റ് ട്യൂമർ സെല്ലുകളെ നോൺ-ടോക്സിക്, നോൺ-റേഡിയോ ആക്ടീവ് കാൽസിൻ എഎം ഉപയോഗിച്ച് ലേബൽ ചെയ്യുന്നതിലൂടെയോ GFP-യിലേക്ക് മാറ്റുന്നതിലൂടെയോ, CAR-T സെല്ലുകൾ വഴി ട്യൂമർ കോശങ്ങളെ നശിപ്പിക്കുന്നത് നിരീക്ഷിക്കാൻ കഴിയും.ലൈവ് ടാർഗെറ്റ് ക്യാൻസർ കോശങ്ങളെ പച്ച കാൽസിൻ എഎം അല്ലെങ്കിൽ ജിഎഫ്‌പി എന്ന് ലേബൽ ചെയ്യുമെങ്കിലും, ചത്ത കോശങ്ങൾക്ക് പച്ച ചായം നിലനിർത്താൻ കഴിയില്ല.Hoechst 33342 എല്ലാ കോശങ്ങളെയും (ടി സെല്ലുകളും ട്യൂമർ കോശങ്ങളും) കറക്കാനായി ഉപയോഗിക്കുന്നു, പകരം, ടാർഗെറ്റ് ട്യൂമർ സെല്ലുകളെ മെംബ്രൺ ബൗണ്ട് കാൽസിൻ എഎം ഉപയോഗിച്ച് സ്റ്റെയിൻ ചെയ്യാം, മൃതകോശങ്ങളെ (ടി സെല്ലുകളും ട്യൂമർ സെല്ലുകളും) കറക്കാൻ PI ഉപയോഗിക്കുന്നു.ഈ കളങ്കപ്പെടുത്തൽ തന്ത്രം വ്യത്യസ്ത കോശങ്ങളെ വിവേചനം ചെയ്യാൻ അനുവദിക്കുന്നു.
ഇ: K562-ന്റെ T അനുപാതത്തെ ആശ്രയിച്ചുള്ള സൈറ്റോടോക്സിസിറ്റി
ഉദാഹരണം Hoechst 33342, CFSE, PI ഫ്ലൂറസെന്റ് ഇമേജുകൾ t = 3 മണിക്കൂറിലെ K562 ടാർഗെറ്റ് സെല്ലുകളാണ്.
തത്ഫലമായുണ്ടാകുന്ന ഫ്ലൂറസന്റ് ചിത്രങ്ങൾ E: T അനുപാതം വർദ്ധിച്ചതിനാൽ Hoechst+CFSE+PI+ ടാർഗെറ്റ് സെല്ലുകളിൽ വർദ്ധനവ് കാണിച്ചു.
