Туршилтын протокол
Цитотоксик % -ийг доорх тэгшитгэлээр тооцоолно.
Цитотоксик чанар % = (Хяналтын амьд тоо – Эмчлэгдсэн амьд тоо) / Хяналтын амьд тоо × 100
Зорилтот хавдрын эсийг хоргүй, цацраг идэвхт бус кальцейн AM эсвэл GFP-ээр дамжуулснаар бид хавдрын эсийг CAR-T эсээр устгаж байгааг хянах боломжтой.Амьд хорт хавдрын эсүүд нь ногоон кальцейн AM эсвэл GFP-ээр тэмдэглэгдсэн байх боловч үхсэн эсүүд ногоон будгийг хадгалж чадахгүй.Hoechst 33342 нь бүх эсийг (Т эс ба хавдрын эсүүд) будахад ашигладаг, өөрөөр хэлбэл зорилтот хавдрын эсийг мембранаар холбогдсон кальцейн AM-аар будаж болно, PI нь үхсэн эсийг (Т эс ба хавдрын эсүүд) будахад ашигладаг.Энэхүү будгийн стратеги нь янз бүрийн эсийг ялгах боломжийг олгодог.
E: T харьцаанаас хамааралтай K562-ийн эсийн хоруу чанар
Жишээ нь Hoechst 33342, CFSE, PI флюресцент зургууд нь t = 3 цагийн K562 зорилтот эсүүд юм.
Үүссэн флюресцент зургууд нь E: T харьцаа нэмэгдэхийн хэрээр Hoechst+CFSE+PI+ зорилтот эсүүд нэмэгдэж байгааг харуулсан.
