सस्पेन्शनमधील पेशी असलेला नमुना ट्रिपन ब्लू डाईमध्ये मिसळत आहे, नंतर काउंटस्टार ऑटोमेटेड सेल काउंटरद्वारे विश्लेषित केलेल्या काउंटस्टार चेंबर स्लाइडमध्ये काढला जातो.क्लासिक ट्रायपॅन ब्लू सेल मोजणी तत्त्वावर आधारित, काउंटस्टारची उपकरणे प्रगत ऑप्टिकल इमेजिंग तंत्रज्ञान, इंटेलिजेंट इमेज रेकग्निशन तंत्रज्ञान आणि शक्तिशाली सॉफ्टवेअर अल्गोरिदम एकत्रित करतात जेणेकरुन केवळ सेलची एकाग्रता आणि व्यवहार्यता प्रदान केली जात नाही तर सेल एकाग्रता, व्यवहार्यता, एकत्रीकरण दर, गोलाकारपणाची माहिती देखील प्रदान केली जाते. , आणि व्यास वितरण फक्त एक धाव.
एकत्रित सेल विश्लेषण
आकृती 3 एकत्रित पेशींची मोजणी.
A. सेल नमुन्याची प्रतिमा;
B. काउंटस्टार बायोटेक सॉफ्टवेअरद्वारे ओळख चिन्हासह सेल नमुन्याची प्रतिमा.(ग्रीन सर्कल: लाईव्ह सेल, यलो सर्कल: डेड सेल, रेड सर्कल: एकत्रित सेल).
C. एकत्रित हिस्टोग्राम
काही प्राथमिक पेशी किंवा उपसंस्कृती पेशी जेव्हा खराब संस्कृतीची स्थिती किंवा जास्त पचन होते तेव्हा एकत्रित होण्याची शक्यता असते, त्यामुळे पेशींच्या मोजणीत मोठी अडचण येते.एग्रीगेशन कॅलिब्रेशन फंक्शनसह, काउंटस्टार अचूक सेल मोजणी सुनिश्चित करण्यासाठी आणि एकत्रीकरण दर आणि एकत्रीकरण हिस्टोग्राम प्राप्त करण्यासाठी एकत्रीकरणांची उत्तेजक गणना करू शकते, अशा प्रकारे प्रयोगकर्त्यांना पेशींच्या स्थितीचा न्याय करण्यासाठी आधार प्रदान करते.
पेशींच्या वाढीचे निरीक्षण
आकृती 4 सेल ग्रो वक्र.
सेल वाढ वक्र ही सेल नंबरची परिपूर्ण वाढ मोजण्यासाठी एक सामान्य पद्धत आहे, सेल एकाग्रता निर्धारित करण्यासाठी एक महत्त्वपूर्ण सूचक आणि पेशींच्या मूलभूत जैविक गुणधर्मांच्या संवर्धनासाठी मूलभूत पॅरामीटर्सपैकी एक आहे.संपूर्ण प्रक्रियेदरम्यान पेशींच्या संख्येतील डायनॅमिक बदलाचे अचूक वर्णन करण्यासाठी, विशिष्ट वाढ वक्र 4 भागांमध्ये विभागले जाऊ शकते: मंद वाढीसह उष्मायन कालावधी;मोठ्या उतारासह घातांकीय वाढीचा टप्पा, पठारी टप्पा आणि घट कालावधी.सेल वाढ वक्र जिवंत पेशींची संख्या (10'000/mL) संवर्धन वेळेच्या (h किंवा d) विरूद्ध प्लॉट करून मिळवता येते.
सेल एकाग्रता आणि व्यवहार्यता मोजणे
आकृती 1 काउंटस्टार बायोटेक द्वारे प्रतिमा कॅप्चर केल्या गेल्या कारण सेल (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9, आणि MDCK) अनुक्रमे ट्रिपन ब्लू द्वारे डागल्या गेल्या.
काउंटस्टार 5-180um व्यासाच्या पेशींना लागू आहे, जसे की सस्तन प्राणी, कीटक सेल आणि काही प्लँक्टन्स.
सेल आकार मापन
आकृती 2 प्लास्मिड ट्रान्सफेक्शनच्या आधी आणि नंतर CHO पेशींचे सेल आकाराचे मापन.
A. प्लाझमिड ट्रान्सफेक्शनच्या आधी आणि नंतर ट्रिपॅन निळ्या रंगाने डागलेल्या CHO पेशींच्या निलंबनाच्या प्रतिमा.
B. प्लास्मिड ट्रान्सफेक्शनच्या आधी आणि नंतर CHO सेल आकाराच्या हिस्टोग्रामची तुलना.
पेशींच्या आकारात बदल हे मुख्य वैशिष्ट्य आहे आणि सामान्यतः सेल संशोधनामध्ये मोजले जाते.सामान्यतः ते या प्रयोगांमध्ये मोजले जाईल: सेल ट्रान्सफेक्शन, ड्रग टेस्ट आणि सेल ऍक्टिव्हेशन अॅसे.Countstar सांख्यिकीय आकारविज्ञान डेटा प्रदान करते, जसे की पेशींचा आकार, 20 च्या आत.
काउंटस्टार ऑटोमेटेड सेल काउंटर सर्कुलरिटी आणि व्यास हिस्टोग्रामसह पेशींचा आकारशास्त्रीय डेटा देऊ शकतो.
