AOPI ड्युअल-फ्लोरेसेस मोजणी हा सेल एकाग्रता आणि व्यवहार्यता शोधण्यासाठी वापरला जाणारा परख प्रकार आहे.अॅक्रिडाइन ऑरेंज (हिरवा-फ्लोरोसंट न्यूक्लिक अॅसिड डाग) आणि प्रोपिडियम आयोडाइड (लाल-फ्लोरोसंट न्यूक्लिक अॅसिड डाग) यांचे मिश्रण आहे.प्रोपिडियम आयोडाइड (पीआय) हा एक झिल्ली अपवर्जन रंग आहे जो केवळ तडजोड केलेल्या पडद्याच्या पेशींमध्ये प्रवेश करतो, तर ऍक्रिडाइन ऑरेंज लोकसंख्येतील सर्व पेशींमध्ये प्रवेश करण्यास सक्षम आहे.जेव्हा दोन्ही रंग न्यूक्लियसमध्ये उपस्थित असतात, तेव्हा प्रोपिडियम आयोडाइड फ्लूरोसेन्स रेझोनान्स एनर्जी ट्रान्सफर (FRET) द्वारे ऍक्रिडाइन ऑरेंज फ्लोरोसेन्समध्ये घट घडवून आणते.परिणामी, अखंड झिल्ली असलेल्या न्यूक्लिएटेड पेशी फ्लोरोसेंट हिरव्या रंगाच्या असतात आणि त्यांना सजीव म्हणून गणले जाते, तर तडजोड केलेल्या झिल्ली असलेल्या न्यूक्लिएटेड पेशी केवळ फ्लोरोसेंट लाल डाग करतात आणि Countstar® FL प्रणाली वापरताना मृत म्हणून गणले जातात.लाल रक्तपेशी, प्लेटलेट्स आणि मोडतोड यांसारखी केंद्रक नसलेली सामग्री फ्लोरोसेस होत नाही आणि Countstar® FL सॉफ्टवेअरद्वारे दुर्लक्ष केले जाते.
स्टेम सेल थेरपीची प्रक्रिया
आकृती 4 सेल थेरपीमध्ये वापरण्यासाठी मेसेन्कायमल स्टेम सेल्स (MSCs) च्या व्यवहार्यता आणि सेल काउंटचे निरीक्षण.
AO/PI आणि Trypan Blue Assay द्वारे MSC व्यवहार्यता निश्चित करा
आकृती 2. A. AO/PI आणि Trypan Blue द्वारे डागलेली MSC ची प्रतिमा;2. वाहतूक करण्यापूर्वी आणि नंतर AO/PI आणि Trypan ब्लू निकालाची तुलना.
सेल रिफ्रॅक्टिव्ह इंडेक्स बदलतो, ट्रायपॅन ब्लू स्टेनिंग इतके स्पष्ट नव्हते, वाहतुकीनंतर व्यवहार्यता निश्चित करणे कठीण आहे.दुहेरी-रंगीत प्रतिदीप्ति जिवंत आणि मृत न्यूक्लिएटेड पेशींना डाग देण्यास परवानगी देते, तर मोडतोड, प्लेटलेट्स आणि लाल रक्तपेशींच्या उपस्थितीतही अचूक व्यवहार्यता परिणाम निर्माण करतात.
