प्रायोगिक प्रोटोकॉल
सायटोटॉक्सिसिटी % ची गणना खालील समीकरणाद्वारे केली जाते.
सायटोटॉक्सिसिटी % = (नियंत्रणाची थेट संख्या - उपचार केलेल्या थेट संख्या) / नियंत्रणाची थेट संख्या × 100
टार्गेट ट्यूमर पेशींना बिगर-विषारी, नॉन-रेडिओएक्टिव्ह कॅल्सीन एएम किंवा GFP सह ट्रान्सफेक्ट लेबल करून, आम्ही CAR-T पेशींद्वारे ट्यूमर पेशींच्या हत्यांचे निरीक्षण करू शकतो.जिवंत लक्ष्य कर्करोगाच्या पेशींना ग्रीन कॅल्सीन एएम किंवा जीएफपी द्वारे लेबल केले जाईल, तर मृत पेशी हिरवा रंग टिकवून ठेवू शकत नाहीत.Hoechst 33342 चा वापर सर्व पेशी (टी पेशी आणि ट्यूमर पेशी दोन्ही) साठी केला जातो, वैकल्पिकरित्या, लक्ष्य ट्यूमर पेशी मेम्ब्रेन बाउंड कॅल्सीन एएमने डागल्या जाऊ शकतात, PI मृत पेशी (दोन्ही टी पेशी आणि ट्यूमर पेशी) डागण्यासाठी वापरला जातो.ही स्टेनिग स्ट्रॅटेजी वेगवेगळ्या पेशींचा भेदभाव करण्यास अनुमती देते.
E: K562 चे T गुणोत्तर अवलंबून सायटोटॉक्सिसिटी
उदाहरण Hoechst 33342, CFSE, PI फ्लोरोसेंट प्रतिमा हे K562 लक्ष्य पेशी आहेत t = 3 तास
परिणामी फ्लोरोसंट प्रतिमांनी ई: टी गुणोत्तर वाढल्यामुळे Hoechst+CFSE+PI+ लक्ष्य पेशींमध्ये वाढ दर्शविली.
