Protokoll Sperimentali
Iċ-ċitotossiċità % hija kkalkulata bl-ekwazzjoni hawn taħt.
Ċitotossiċità % = (Għadd ħajjin ta' kontroll – Għadd ħajjin ta' trattat) / Għadd ħajjin ta' kontroll × 100
Billi nittikkettjaw iċ-ċelloli tat-tumur fil-mira b'calcein AM mhux tossiku u mhux radjuattiv jew trasfett b'GFP, nistgħu nissorveljaw il-qtil taċ-ċelloli tat-tumur minn ċelloli CAR-T.Filwaqt li ċ-ċelloli ħajjin tal-kanċer fil-mira se jkunu ttikkettjati b'kalċina ħadra AM jew GFP, iċ-ċelloli mejta ma jistgħux iżommu ż-żebgħa ħadra.Hoechst 33342 jintuża għat-tebgħa taċ-ċelluli kollha (kemm iċ-ċelluli T kif ukoll iċ-ċelluli tat-tumur), alternattivament, iċ-ċelluli tat-tumur fil-mira jistgħu jiġu mtebbgħin b'calcein marbut mal-membrana AM, PI jintuża għat-tebgħa taċ-ċelluli mejta (kemm ċelluli T kif ukoll ċelluli tat-tumur).Din l-istrateġija tat-tbajja tippermetti d-diskriminazzjoni ta 'ċelluli differenti.
E: T Ċitotossiċità dipendenti fuq il-proporzjon ta 'K562
L-eżempju Hoechst 33342, CFSE, immaġini fluworexxenti PI huma ċ-ċelloli fil-mira K562 f't = 3 sigħat
L-immaġini fluworexxenti li rriżultaw urew żieda fiċ-ċelloli Hoechst+CFSE+PI+ Target hekk kif żdied il-proporzjon E:T