စမ်းသပ်မှု ပရိုတိုကော
cytotoxicity % ကို အောက်ဖော်ပြပါ ညီမျှခြင်းဖြင့် တွက်ချက်သည်။
Cytotoxicity % = (ထိန်းချုပ်မှု၏ တိုက်ရိုက်ရေတွက်မှုများ – ကုသထားသော တိုက်ရိုက်အရေအတွက်များ) / ထိန်းချုပ်မှု၏ တိုက်ရိုက်အရေအတွက် × 100
ပစ်မှတ်အကျိတ်ဆဲလ်များကို အဆိပ်အတောက်မရှိ၊ ရေဒီယိုသတ္တိကြွမဟုတ်သော calcein AM ဖြင့် တံဆိပ်တပ်ခြင်းဖြင့် သို့မဟုတ် GFP ဖြင့် ကူးပြောင်းခြင်းဖြင့်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် CAR-T ဆဲလ်များဖြင့် အကျိတ်ဆဲလ်များသေဆုံးမှုကို စောင့်ကြည့်နိုင်ပါသည်။တိုက်ရိုက်ပစ်မှတ်ထားသော ကင်ဆာဆဲလ်များကို အစိမ်းရောင် calcein AM သို့မဟုတ် GFP ဖြင့် တံဆိပ်တပ်ထားသော်လည်း ဆဲလ်သေများသည် အစိမ်းရောင်ဆိုးဆေးကို မထိန်းသိမ်းနိုင်ပါ။Hoechst 33342 ကို ဆဲလ်အားလုံး (T ဆဲလ်များနှင့် အကျိတ်ဆဲလ်များ) တွင် စွန်းထင်းရန်အသုံးပြုသည် သို့မဟုတ် တစ်နည်းအားဖြင့် ပစ်မှတ်အကျိတ်ဆဲလ်များကို အမြှေးပါးဖြင့် ချည်နှောင်ထားသော calcein AM၊ PI ကို ဆဲလ်သေများ (T ဆဲလ်များနှင့် အကျိတ်ဆဲလ်နှစ်ခုလုံး) စွန်းထင်းရန်အတွက် အသုံးပြုသည်။ဤအရောင်ခြယ်နည်းဗျူဟာသည် မတူညီသောဆဲလ်များကို ခွဲခြားဆက်ဆံနိုင်စေပါသည်။
E: T အချိုးသည် K562 ၏ Cytotoxicity ကို မှီခိုသည်။
ဥပမာ Hoechst 33342၊ CFSE၊ PI ချောင်းပုံများသည် K562 ပစ်မှတ်ဆဲလ်များကို t = 3 နာရီ၊
E:T အချိုး တိုးလာသည်နှင့်အမျှ Hoechst+CFSE+PI+ ပစ်မှတ်ဆဲလ်များ တိုးလာခြင်းကြောင့် ထွက်ပေါ်လာသော မီးချောင်းပုံများသည် ပြသခဲ့သည်