प्रयोगात्मक प्रोटोकल
साइटोटोक्सिसिटी % तलको समीकरणद्वारा गणना गरिएको छ।
साइटोटोक्सिसिटी % = (नियन्त्रणको प्रत्यक्ष गणना - उपचार गरिएको प्रत्यक्ष गणना) / प्रत्यक्ष गणनाको नियन्त्रण × 100
लक्षित ट्यूमर कोशिकाहरूलाई गैर-विषाक्त, गैर-रेडियोएक्टिभ क्याल्सिन एएम वा GFP सँग ट्रान्सफेक्टको साथ लेबल गरेर, हामी CAR-T कोशिकाहरूद्वारा ट्युमर कोशिकाहरूको हत्याको निगरानी गर्न सक्छौं।जीवित लक्ष्य क्यान्सर कोशिकाहरूलाई हरियो क्याल्सिन एएम वा GFP द्वारा लेबल गरिनेछ, मृत कोशिकाहरूले हरियो डाईलाई कायम राख्न सक्दैनन्।Hoechst 33342 सबै कोशिकाहरू (टी कोशिकाहरू र ट्युमर कोशिकाहरू दुवै) दागको लागि प्रयोग गरिन्छ, वैकल्पिक रूपमा, लक्षित ट्युमर कोशिकाहरूलाई झिल्ली बाउन्ड क्याल्सिन एएमले दाग लगाउन सकिन्छ, PI लाई मृत कोशिकाहरू (टी कोशिकाहरू र ट्युमर कोशिकाहरू दुवै) दाग गर्न प्रयोग गरिन्छ।यो दाग रणनीतिले विभिन्न कक्षहरूको भेदभावको लागि अनुमति दिन्छ।
E: K562 को T अनुपात निर्भर साइटोटोक्सिसिटी
उदाहरण Hoechst 33342, CFSE, PI फ्लोरोसेन्ट छविहरू T = 3 घण्टामा K562 लक्ष्य कक्षहरू हुन्।
परिणामस्वरूप फ्लोरोसेन्ट छविहरूले Hoechst+CFSE+PI+ लक्ष्य कक्षहरूमा E: T अनुपात बढेको देखाएको छ।
