Een monster dat cellen in suspensie bevat, wordt gemengd met Trypan-blauwe kleurstof en vervolgens in de Countstar Chamber Slide getrokken, geanalyseerd door Countstar Automated Cell Counter.Gebaseerd op het klassieke principe van het tellen van blauwe cellen, integreren de instrumenten van Countstar geavanceerde optische beeldvormingstechnologie, intelligente beeldherkenningstechnologie en krachtige software-algoritmen om niet alleen de celconcentratie en levensvatbaarheid te bieden, maar ook de informatie te verstrekken over celconcentratie, levensvatbaarheid, aggregatiesnelheid, rondheid , en diameterverdeling met slechts één run.
Geaggregeerde celanalyse
Figuur 3 Tellen van geaggregeerde cellen.
A. Afbeelding van celmonster;
B. Afbeelding van celmonster met identificatiemerk door Countstar BioTech-software.(Groene cirkel: levende cel, gele cirkel: dode cel, rode cirkel: geaggregeerde cel).
C. Geaggregeerd histogram
Sommige primaire cellen of subcultuurcellen zijn vatbaar voor aggregatie in een slechte kweektoestand of overmatige vertering, waardoor grote moeilijkheden bij het tellen van cellen ontstaan.Met de aggregatiekalibratiefunctie kan Countstar een stimulatieberekening van aggregaties realiseren om een nauwkeurige celtelling te garanderen en de aggregatiesnelheid en het aggregatiehistogram te verkrijgen, waardoor onderzoekers een basis krijgen om de toestand van cellen te beoordelen.
Monitoring van celgroei
Figuur 4 Celgroeicurve.
Celgroeicurve is een veelgebruikte methode voor het meten van de absolute groei van het aantal cellen, een belangrijke indicator om de celconcentratie te bepalen en een van de basisparameters voor het kweken van de fundamentele biologische eigenschappen van cellen.Om de dynamische verandering in het aantal cellen gedurende het hele proces nauwkeurig te beschrijven, kan de typische groeicurve in 4 delen worden verdeeld: incubatieperiode met langzame groei;exponentiële groeifase met grote helling, plateaufase en afnameperiode.De celgroeicurve kan worden verkregen door het aantal levende cellen (10.000/mL) uit te zetten tegen de kweektijd (h of d).
Celconcentratie en levensvatbaarheid meten
Figuur 1 Beelden werden vastgelegd door Countstar BioTech terwijl cellen (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 en MDCK) in suspensie respectievelijk werden gekleurd door Trypan Blue.
Countstar is toepasbaar op cellen met een diameter tussen 5-180um, zoals zoogdiercellen, insectencellen en sommige planktons.
Celgrootte meting
Figuur 2 Celgrootte Meting van CHO-cellen voor en na de plasmidetransfectie.
A. Afbeeldingen van CHO-celsuspensie gekleurd door trypanblauw voor en na de plasmidetransfectie.
B. Vergelijking van CHO-celgroottehistogram voor en na de plasmidetransfectie.
De verandering van celgrootte is een belangrijk kenmerk en wordt vaak gemeten in celonderzoek.Normaal gesproken wordt het gemeten in deze experimenten: celtransfectie, medicijntest en celactiveringsassays.Countstar biedt statistische morfologische gegevens, zoals de grootte van cellen, binnen 20s.
Countstar geautomatiseerde celteller kan de morfologische gegevens van cellen geven, inclusief circulariteit en diameterhistogrammen.
