Op biologische en op AAV gebaseerde gentherapieën winnen meer marktaandeel voor de behandeling van ziekten.Het ontwikkelen van een robuuste en efficiënte zoogdiercellijn voor hun productie is echter een uitdaging en vereist meestal uitgebreide cellulaire karakterisering.Historisch gezien wordt een flowcytometer gebruikt in deze celgebaseerde testen.Een flowcytometer is echter relatief duur en vereist uitgebreide training voor zowel bediening als onderhoud.Onlangs, met een toename van computermogelijkheden en hoogwaardige camerasensoren, is beeldgebaseerde cytometrie geïnnoveerd om een nauwkeurig en kosteneffectief alternatief te bieden voor de ontwikkeling van cellijnprocessen.In dit werk hebben we een cellijn-ontwikkelingsworkflow beschreven met een op afbeeldingen gebaseerde cytometer, namelijk de Countstar Rigel, voor de beoordeling van de transfectie-efficiëntie en de evaluatie van de stabiele pool met behulp van CHO- en HEK293-cellen die respectievelijk antilichaam en rAAV-vector tot expressie brengen.In de twee casestudies hebben we aangetoond:
- Countstar Rigel leverde een vergelijkbare detectienauwkeurigheid als flowcytometrie.
- Op Countstar Rigel gebaseerde poolevaluatie kan helpen bij het bepalen van de gewenste groep voor single-cell cloning (SCC).
- Het door Countstar Rigel geïncorporeerde cellijnontwikkelingsplatform bereikte een mAb-titer van 2,5 g/L.
We bespraken ook de mogelijkheid om Countstar te gebruiken als een andere laag van een op rAAV DoE gebaseerd optimalisatiedoel.
voor meer details kunt u het PDF-bestand downloaden.
