Dual-fluorescence Viability (AO/PI), Acridine orange (AO) og propidiumjodid (PI) er nukleær nukleinfarging og syrebindende fargestoffer.AO kan trenge gjennom membranen til både døde og levende celler og flekker kjernen, og genererer en grønn fluorescens.I motsetning til dette kan PI bare trenge gjennom de desintegrerende membranene til døde kjerneholdige celler, og generere rød fluorescens.Den bildebaserte teknologien til Countstar Rigel utelukker cellefragmenter, rusk og artefaktpartikler samt underdimensjonerte hendelser som blodplater, noe som gir et svært nøyaktig resultat.Avslutningsvis kan Countstar Rigel-systemet brukes for hvert trinn i celleproduksjonsprosessen.

T/NK-cellemediert cytotoksisitet, I den nylig FDA-godkjente CAR-T-celleterapien binder genetisk konstruerte T-lymfocytter seg spesifikt til de målrettede kreftcellene (T) og dreper dem.Countstar Rigel-analysatorene er i stand til å analysere denne komplette prosessen med T/NK-cellemediert cytotoksisitet.

Cytotoksisitetsstudier utføres ved å merke målkreftcellene med CFSE eller transfisere dem med GFP.Hoechst 33342 kan brukes til å farge alle celler (både T-celler og tumorceller).Alternativt kan måltumorceller farges med CFSE.Propidiumjodid (PI) brukes til å farge døde celler (både T-celler og tumorceller).Diskriminering mellom forskjellige celler kan oppnås ved å bruke denne fargestrategien.

GFP-transfeksjonseffektivitet, i molekylær genetikk, ulike modellorganismer og cellebiologi, brukes GFP-genet ofte som reporter for ekspresjonsstudier.For tiden bruker forskere ofte fluorescerende mikroskoper eller flowcytometre for å analysere transfeksjonseffektiviteten til pattedyrceller.Men å håndtere den komplekse teknologien til et avansert flowcytometer krever en erfaren og høyt kvalifisert operatør.Countstar Rigel gjør det mulig for brukere å enkelt og nøyaktig utføre en transfeksjonseffektivitetsanalyse uten drifts- og vedlikeholdskostnadene forbundet med tradisjonell flowcytometri.

Celleapoptose, fremdriften av celleapoptose kan overvåkes ved å bruke FITC-konjugert Annexin-V i kombinasjon med 7-ADD.Fosfatidylserin (PS)-rester er normalt lokalisert på innsiden av plasmamembranen til friske celler.Under tidlig apoptose går membranintegriteten tapt og PS vil bli translokert til utsiden av cellemembranen.Annexin V har en sterk affinitet til PS og er derfor den ideelle markøren for tidlige apoptotiske celler.

Cellesyklus, under celledeling inneholder celler økte mengder DNA.Merket av PI, er en økning i fluorescensintensitet direkte proporsjonal med en akkumulering av DNA.Forskjellene i fluorescensintensitetene til enkeltcellene er indikatorene på den faktiske statusen til cellesyklusen. MCF 7-celler ble behandlet med 4μM Nocodazole for å arrestere disse cellene i forskjellige stadier av cellesyklusen.Lysfeltbildene som ble oppnådd under dette testscenarioet lar oss identifisere hver enkelt celle.PI-fluorescenskanalen til Countstar Rigel identifiserer DNA-signalene til enkeltceller selv i aggregater.En detaljert analyse av fluorescensintensitetene kan utføres ved å bruke FCS.

CD Marker Fenotyping, Countstar Rigel-modellene tilbyr en raskere, enklere og mer sensitiv tilnærming til, mer effektiv immunbasert fenotyping av celler.Med høyoppløselige bilder og kraftige integrerte dataanalysefunksjoner lar Countstar Rigel brukere oppnå konsekvent pålitelige resultater uten behov for omfattende komplekse kontrollinnstillinger og fluorescenskompensasjonsjusteringer.

Cytokine Induced Killer (CIK) celledifferensiering demonstrerer den enestående ytelseskvaliteten til Countstar Rigel-analysatoren i direkte sammenligning med høyklasses flowcytometre.PBMC-er av mus i kultur ble farget med CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE og CD56-PE, og indusert av Interleukin (IL) 6. Deretter analysert samtidig med Countstar® Rigel og Flow Cytometri.I denne testen ble CD3-CD4, CD3-CD8 og CD3-CD56 delt inn i tre grupper for å bestemme andelen av forskjellige cellesubpopulasjoner.

Påvisning av degenererte celler ved immunfluorescens, monoklonale antistoffer som produserer cellelinjer vil miste noen positive kloner under celleproliferasjon og passasje på grunn av nedbrytning eller genetiske mutasjoner.Et høyere tap vil i betydelig grad påvirke produktiviteten til produksjonsprosessen.Overvåkingen av nedbrytningen spiller en viktig rolle i prosesskontrollen for å flytte utbyttet av antistoffer til det optimale.

De fleste antistoffene som produseres i BioPharma-industrien kan påvises ved immunfluorescensmerking og analyseres kvantitativt av Countstar Rigel-serien.Lysfelt- og fluorescenskanalbildene nedenfor viser tydelig de klonene som mistet egenskapen til å produsere de ønskede antistoffene.Den mer detaljerte analysen med DeNovo FCS Express Image-programvaren bekrefter at 86,35 % av alle celler uttrykker immunglobulinene, kun 3,34 % er klart negative.

Trypan (bokstav B i blått) Celletelling, trypanblåfarging brukes fortsatt i de fleste cellekulturlaboratorier.

Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp kan installeres på alle Countstar Rigel-modeller.Våre beskyttede bildegjenkjenningsalgoritmer analyserer mer enn 20 parametere for å klassifisere hvert enkelt objekt som oppdages.

Cell Line Storage QC, I cellelagring sikrer et sofistikert kvalitetsstyringskonsept sikker, effektiv overvåking av alle cellulære produkter.Dette garanterer den stabile kvaliteten på celle kryokonservert, kryokonservert for eksperimenter, prosessutvikling og produksjon.

Countstar Rigel får bilder med høy oppløsning, og analyserer forskjellige morfologiske egenskaper ved de cellulære objektene som diameter, form og aggregeringstendens.Bilder av ulike prosesstrinn kan enkelt sammenlignes med hverandre.Så variasjoner i form og aggregering kan lett oppdages, ved å unngå subjektive menneskelige målinger.Og Countstar Rigel-databasen har et sofistikert styringssystem for lagring og henting av bilder og data.