ਬਿਨਾਂ ਲਾਇਸਿੰਗ ਦੇ ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਲਿਊਕੋਸਾਈਟਸ ਦਾ ਸਿੱਧਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ

ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਲਿਊਕੋਸਾਈਟਸ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨਾ ਕਲੀਨਿਕਲ ਲੈਬ ਜਾਂ ਬਲੱਡ ਬੈਂਕ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਰੁਟੀਨ ਜਾਂਚ ਹੈ।ਲਿਊਕੋਸਾਈਟਸ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਖੂਨ ਦੇ ਭੰਡਾਰਨ ਦੇ ਗੁਣਵੱਤਾ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਸੂਚਕਾਂਕ ਹਨ।ਲਿਊਕੋਸਾਈਟ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਵੱਡੀ ਗਿਣਤੀ ਵਿੱਚ ਪਲੇਟਲੈਟਸ, ਲਾਲ ਖੂਨ ਦੇ ਸੈੱਲ, ਜਾਂ ਸੈਲੂਲਰ ਮਲਬੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਸਿੱਧੇ ਮਾਈਕ੍ਰੋਸਕੋਪ ਜਾਂ ਚਮਕਦਾਰ ਫੀਲਡ ਸੈੱਲ ਕਾਊਂਟਰ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਦਾ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨਾ ਅਸੰਭਵ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਚਿੱਟੇ ਰਕਤਾਣੂਆਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਕਰਨ ਦੇ ਰਵਾਇਤੀ ਤਰੀਕਿਆਂ ਵਿੱਚ ਆਰਬੀਸੀ ਲਾਈਸਿਸ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਸਮਾਂ ਲੈਣ ਵਾਲੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।

ਏਓਪੀਆਈ ਡੁਅਲ-ਫਲੋਰੋਸੇਸ ਕਾਉਂਟਿੰਗ ਸੈੱਲ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣ ਲਈ ਵਰਤੀ ਜਾਂਦੀ ਪਰਖ ਦੀ ਕਿਸਮ ਹੈ।ਹੱਲ ਐਕ੍ਰਿਡਾਈਨ ਸੰਤਰੀ (ਹਰੇ-ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਨਿਊਕਲੀਇਕ ਐਸਿਡ ਦਾਗ) ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ (ਲਾਲ-ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਦਾਗ) ਦਾ ਸੁਮੇਲ ਹੈ।ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ (PI) ਇੱਕ ਝਿੱਲੀ ਦੀ ਬੇਦਖਲੀ ਰੰਗਤ ਹੈ ਜੋ ਸਿਰਫ ਕਮਜ਼ੋਰ ਝਿੱਲੀ ਵਾਲੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਦਾਖਲ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਐਕਰੀਡਾਈਨ ਸੰਤਰੀ ਆਬਾਦੀ ਵਿੱਚ ਸਾਰੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਵੇਸ਼ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਜਦੋਂ ਦੋਵੇਂ ਰੰਗ ਨਿਊਕਲੀਅਸ ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਤਾਂ ਪ੍ਰੋਪੀਡੀਅਮ ਆਇਓਡਾਈਡ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਰੈਜ਼ੋਨੈਂਸ ਐਨਰਜੀ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ (FRET) ਦੁਆਰਾ ਐਕਰੀਡਾਈਨ ਔਰੇਂਜ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਵਿੱਚ ਕਮੀ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣਦਾ ਹੈ।ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ, ਬਰਕਰਾਰ ਝਿੱਲੀ ਵਾਲੇ ਨਿਊਕਲੀਏਟਿਡ ਸੈੱਲ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਹਰੇ ਰੰਗ ਦੇ ਦਾਗ ਬਣਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਲਾਈਵ ਵਜੋਂ ਗਿਣੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਜਦੋਂ ਕਿ ਸਮਝੌਤਾ ਕੀਤੀ ਝਿੱਲੀ ਵਾਲੇ ਨਿਊਕਲੀਏਟਿਡ ਸੈੱਲ ਸਿਰਫ਼ ਫਲੋਰੋਸੈੰਟ ਲਾਲ ਰੰਗ ਦੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ® ਰਿਗੇਲ ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ ਮਰੇ ਹੋਏ ਗਿਣੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।

ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਜਨਸੰਖਿਆ ਦੀ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਜਾਂਚਾਂ ਲਈ ਇੱਕ ਆਦਰਸ਼ ਹੱਲ ਹੈ, ਜੋ ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਵਿੱਚ ਚਿੱਟੇ-ਖੂਨ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਦਾ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕਰਨ ਦੇ ਯੋਗ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।

ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ:

1. 20 µl ਖੂਨ ਦਾ ਨਮੂਨਾ ਲਓ ਅਤੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ 180 µl PBS ਵਿੱਚ ਪਤਲਾ ਕਰੋ।
2. 12µl AO/PI ਘੋਲ ਨੂੰ 12µl ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਪਾਈਪੇਟ ਨਾਲ ਨਰਮੀ ਨਾਲ ਮਿਲਾਓ;
3. ਚੈਂਬਰ ਸਲਾਈਡ ਵਿੱਚ 20µl ਮਿਸ਼ਰਣ ਖਿੱਚੋ;
4. ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਲਗਭਗ 1 ਮਿੰਟ ਲਈ ਚੈਂਬਰ ਵਿੱਚ ਸੈਟਲ ਹੋਣ ਦਿਓ;
5. ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ FL ਯੰਤਰ ਵਿੱਚ ਸਲਾਈਡ ਨੂੰ ਕੀਟ ਕਰੋ;
6. "AO/PI ਵਿਹਾਰਕਤਾ" ਪਰਖ ਚੁਣੋ, ਫਿਰ ਇਸ ਨਮੂਨੇ ਲਈ ਨਮੂਨਾ ID ਦਾਖਲ ਕਰੋ।
7. ਡਾਇਲਿਊਸ਼ਨ ਅਨੁਪਾਤ, ਸੈੱਲ ਕਿਸਮ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰੋ, ਟੈਸਟ ਸ਼ੁਰੂ ਕਰਨ ਲਈ 'ਚਲਾਓ' 'ਤੇ ਕਲਿੱਕ ਕਰੋ।

ਸਾਵਧਾਨ: AO ਅਤੇ PI ਇੱਕ ਸੰਭਾਵੀ ਕਾਰਸੀਨੋਜਨ ਹੈ।ਇਹ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਕਿ ਆਪਰੇਟਰ ਚਮੜੀ ਅਤੇ ਅੱਖਾਂ ਦੇ ਸਿੱਧੇ ਸੰਪਰਕ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਨਿੱਜੀ ਸੁਰੱਖਿਆ ਉਪਕਰਣ (PPE) ਪਹਿਨੇ।

ਨਤੀਜਾ:

1. ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਦਾ ਚਮਕਦਾਰ ਖੇਤਰ ਚਿੱਤਰ

ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਦੇ ਚਮਕਦਾਰ ਖੇਤਰ ਚਿੱਤਰ ਵਿੱਚ, ਡਬਲਯੂਬੀਸੀ ਲਾਲ ਖੂਨ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਈ ਨਹੀਂ ਦਿੰਦੇ ਹਨ।(ਚਿੱਤਰ 1)

ਚਿੱਤਰ 1 ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਦਾ ਚਮਕਦਾਰ ਖੇਤਰ ਚਿੱਤਰ।

2. ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਦਾ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਚਿੱਤਰ

AO ਅਤੇ PI ਡਾਈ ਸੈੱਲਾਂ ਦੇ ਸੈੱਲ ਨਿਊਕਲੀਅਸ ਵਿੱਚ ਦੋਵੇਂ ਧੱਬੇ ਡੀਐਨਏ ਹਨ।ਇਸ ਲਈ, ਪਲੇਟਲੈਟਸ, ਲਾਲ ਖੂਨ ਦੇ ਸੈੱਲ, ਜਾਂ ਸੈਲੂਲਰ ਮਲਬੇ ਲਿਊਕੋਸਾਈਟਸ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਵਿਹਾਰਕਤਾ ਦੇ ਨਤੀਜੇ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਅਸਮਰੱਥ ਹਨ।ਲਾਈਵ ਲਿਊਕੋਸਾਈਟਸ (ਹਰੇ) ਅਤੇ ਮਰੇ ਹੋਏ ਲਿਊਕੋਸਾਈਟਸ (ਲਾਲ) ਨੂੰ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਚਿੱਤਰਾਂ ਵਿੱਚ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਦੇਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।(ਚਿੱਤਰ 2)

ਚਿੱਤਰ 2 ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਦੀਆਂ ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਚਿੱਤਰ।(ਏ)।AO ਚੈਨਲ ਦਾ ਚਿੱਤਰ;(ਬੀ) PI ਚੈਨਲ ਦਾ ਚਿੱਤਰ;(C) AO ਅਤੇ PI ਚੈਨਲ ਦੀਆਂ ਤਸਵੀਰਾਂ ਨੂੰ ਮਿਲਾਓ।

3. ਲਿਊਕੋਸਾਈਟਸ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ ਅਤੇ ਵਿਹਾਰਕਤਾ

ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ FL ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਆਪਣੇ ਆਪ ਤਿੰਨ ਚੈਂਬਰ ਸੈਕਸ਼ਨਾਂ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਕਰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਕੁੱਲ WBC ਸੈੱਲ ਗਿਣਤੀ (1202), ਇਕਾਗਰਤਾ (1.83 x 106 ਸੈੱਲ/ਮਿਲੀ), ਅਤੇ % ਵਿਹਾਰਕਤਾ (82.04%) ਦੇ ਔਸਤ ਮੁੱਲ ਦੀ ਗਣਨਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਵਾਧੂ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਜਾਂ ਡੇਟਾ ਆਰਕਾਈਵਿੰਗ ਲਈ ਪੂਰੇ ਖੂਨ ਦੀਆਂ ਤਸਵੀਰਾਂ ਅਤੇ ਡੇਟਾ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ PDF, ਚਿੱਤਰ ਜਾਂ ਐਕਸਲ ਦੇ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਨਿਰਯਾਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਚਿੱਤਰ 3 ਕਾਊਂਟਸਟਾਰ ਰਿਗੇਲ ਸੌਫਟਵੇਅਰ ਦਾ ਸਕ੍ਰੀਨਸ਼ੌਟ