Próbkę zawierającą komórki w zawiesinie miesza się z barwnikiem błękitu Trypanu, a następnie wciąga do szkiełka Countstar Chamber Slide analizowanego przez Countstar Automated Cell Counter.W oparciu o klasyczną zasadę liczenia komórek trypan blue, instrumenty Countstar integrują zaawansowaną technologię obrazowania optycznego, inteligentną technologię rozpoznawania obrazu i potężne algorytmy oprogramowania, aby nie tylko zapewnić stężenie i żywotność komórek, ale także dostarczyć informacje o stężeniu komórek, żywotności, szybkości agregacji, okrągłości i rozkład średnic przy tylko jednym przebiegu.
Zagregowana analiza komórek
Rysunek 3 Zliczanie zagregowanych komórek.
A. Obraz próbki komórki;
B. Obraz próbki komórki ze znakiem identyfikacyjnym z oprogramowania Countstar BioTech.(Zielone kółko: żywa komórka, żółte kółko: martwa komórka, czerwone kółko: zagregowana komórka).
C. Zagregowany histogram
Niektóre komórki pierwotne lub komórki podhodowli mają skłonność do agregacji w złym stanie hodowli lub nadmiernym trawieniu, co powoduje duże trudności w liczeniu komórek.Dzięki funkcji kalibracji agregacji Countstar może przeprowadzać obliczenia stymulacji agregacji, aby zapewnić dokładne zliczanie komórek i uzyskanie szybkości agregacji oraz histogramu agregacji, zapewniając w ten sposób eksperymentatorom podstawę do oceny stanu komórek.
Monitorowanie wzrostu komórek
Rysunek 4 Krzywa wzrostu komórek.
Krzywa wzrostu komórek jest powszechną metodą pomiaru bezwzględnego wzrostu liczby komórek, ważnym wskaźnikiem do określania stężenia komórek i jednym z podstawowych parametrów hodowli podstawowych biologicznych właściwości komórek.Aby dokładnie opisać dynamiczną zmianę liczby komórek w całym procesie, typową krzywą wzrostu można podzielić na 4 części: okres inkubacji z powolnym wzrostem;wykładnicza faza wzrostu z dużym nachyleniem, faza plateau i okres spadku.Krzywą wzrostu komórek można otrzymać przez wykreślenie liczby żywych komórek (10 000/ml) w funkcji czasu hodowli (h lub d).
Pomiar stężenia i żywotności komórek
Figura 1 Obrazy zostały zarejestrowane przez Countstar BioTech, gdy komórki (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 i MDCK) w zawiesinie wybarwiono odpowiednio błękitem trypanowym.
Countstar ma zastosowanie do komórek o średnicy od 5-180 μm, takich jak komórka ssaka, komórka owada i niektóre planktony.
Pomiar rozmiaru komórki
Figura 2 Pomiar wielkości komórek komórek CHO przed i po transfekcji plazmidu.
A. Obrazy zawiesiny komórek CHO barwionych błękitem trypanu przed i po transfekcji plazmidem.
B. Porównanie histogramu wielkości komórek CHO przed i po transfekcji plazmidu.
Zmiana rozmiaru komórki jest kluczową cechą i jest powszechnie mierzona w badaniach nad komórkami.Zwykle będzie to mierzone w tych eksperymentach: transfekcja komórkowa, test narkotykowy i testy aktywacji komórek.Countstar dostarcza dane statystyczne dotyczące morfologii, takie jak rozmiary komórek, w ciągu 20 sekund.
Automatyczny licznik komórek Countstar może podawać dane morfologiczne komórek, w tym histogramy kołowości i średnicy.
