خلاصه: Mesenchymal سټیم حجرې د pluripotent سټیم حجرو فرعي سیټ دي چې د میسوډرم څخه جلا کیدی شي.د دوی د ځان نقل نوي کولو او څو اړخیزو توپیرونو ځانګړتیاو سره، دوی په طب کې د مختلف درملنې لپاره لوړ ظرفیت لري.Mesenchymal سټیم حجرې یو ځانګړی معافیت فینوټایپ او د معافیت تنظیم کولو وړتیا لري.له همدې امله، mesenchymal سټیم حجرې لا دمخه په پراخه کچه د سټیم حجرو لیږد، نسج انجنیري، او د عضوي لیږد په برخه کې کارول کیږي.او د دې غوښتنلیکونو هاخوا ، دوی د نسج انجینرۍ کې د مثالي وسیلې په توګه کارول کیږي د تخم حجرو په توګه د لومړني او کلینیکي څیړنو تجربو لړۍ کې.تر اوسه پورې، د mesenchymal سټیم حجرو کیفیت کنټرول لپاره په پراخه کچه منل شوي میتود او معیار شتون نلري.Countstar Rigel کولی شي د دې سټیم حجرو د تولید او توپیر په جریان کې غلظت، وړتیا، او د فینوټایپ ځانګړتیاوې (او د دوی بدلونونه) وڅاري.Countstar Rigel د اضافي مورفولوژیکي معلوماتو په ترلاسه کولو کې هم ګټه لري، د دایمي روښانه فیلډ او فلوروسینس پر بنسټ د عکس ثبتولو لخوا چمتو شوي د حجرو کیفیت څارنې ټولې پروسې په جریان کې.Countstar Rigel د سټیم حجرو د کیفیت کنټرول لپاره ګړندی، پیچلي، او د باور وړ میتود وړاندې کوي.
مواد او دودونه:
د اډیپوز څخه ترلاسه شوي mesenchymal سټیم حجرې (AdMSCs) د پروفیسور نینمین کیو ، AO/PI داغ کولو حل (Shanghai RuiYu, CF002) لخوا ډالۍ شوي.انټي باډي: CD29، CD34، CD45، CD56، CD73، CD105، HLADR (BD شرکت).
AdMSCs په 37℃، 5% CO2 رطوبت شوي انکیوبیټر کې کرل شوي.د کارولو دمخه د ټریپسین سره هضم کړئ.
د CD مارکر داغ کولو پروسیجر د انټي باډي لارښود په توګه تعقیب شو.
د Countstar Rigel سره د CD مارکر کشف:
1. د سیګنال رنګ غوښتنلیک طرزالعمل د PE چینل په ترتیب سره د PE فلوروسینس عکس ته رامینځته شوی.
2. د هرې خونې څخه 3 ساحې نیول شوي.
3. وروسته له دې چې عکس العمل او ابتدايي تحلیل بشپړ شو، د FCS سافټویر لخوا د مثبت او منفي لیږد لپاره حد (لوګ دروازه) ترتیب شوی.
د سټیم حجرو کیفیت کنټرول
لاندې شکل (شکل 1) د طرزالعمل ښیي د سټیم سیل درملنه .
شکل 1: د سټیم سیل درملنې طرزالعمل
پایلې:
د AdMSCs غلظت، وړتیا، قطر او مجموعه معلومول.
د AdMSCs وړتیا د AO/PI لخوا ټاکل شوې وه، د دوه رنګه غوښتنلیک طرزالعمل د AO او PI فلوروسینس عکس ته د شنه چینل او ریډ چینل په ترتیب کولو سره رامینځته شوی و.د بیلګې په توګه انځورونه په 2 شکل کې ښودل شوي.
شکل 2. د AdMSCs د ترانسپورت دمخه او وروسته ترانسپورت عکسونه.الف. د ترانسپورت څخه مخکې؛یو استازی انځور ښودل شوی.ب. د ترانسپورت وروسته؛یو استازی انځور ښودل شوی.
د AdMSCs وړتیا د ترانسپورت څخه وروسته په پراخه کچه بدلون موندلی کله چې د ترانسپورت دمخه پرتله کیږي.د ترانسپورت په وړاندې د عمل وړتیا %92 وه، مګر دا د ترانسپورت وروسته 71% ته راټیټه شوه.پایله په 3 شکل کې ښودل شوې.
شکل 3. د AdMSCs د وړتیا پایلې (د ترانسپورت دمخه او وروسته ترانسپورت)
قطر او مجموعه هم د Countstar Rigel لخوا ټاکل شوې وه.د AdMSCs قطر د ترانسپورت څخه وروسته په ډراماتیک ډول بدل شو کله چې د ترانسپورت دمخه پرتله کیږي.د ترانسپورت دمخه قطر 19µm و، مګر دا د ترانسپورت وروسته 21µm ته لوړ شو.د ترانسپورت د مخکینۍ مجموعه 20٪ وه، مګر دا د ترانسپورت وروسته 25٪ ته لوړه شوه.د Countstar Rigel لخوا اخیستل شوي عکسونو څخه، د AdMSCs فینوټایپ د ترانسپورت وروسته په چټکۍ سره بدل شوی.پایلې په 4 شکل کې ښودل شوي.
شکل 4: د قطر او مجموعې پایلې.A: د AdMSCs نمایندګي انځورونه، د AdMSCs فینوټایپ د ترانسپورت وروسته په چټکۍ سره بدل شوي.ب: د ترانسپورت څخه مخکی مجموعه 20٪ وه، مګر د ترانسپورت وروسته 25٪ ته لوړه شوه.ج: د ترانسپورت څخه مخکې قطر 19µm و، خو تر ترانسپورت وروسته 21µm ته لوړ شو.
د Countstar Rigel لخوا د AdMSCs معافیت فینوټائپ مشخص کړئ
د AdMSCs معافیت د Countstar Rigel لخوا ټاکل شوی و، AdMSCs په ترتیب سره د مختلف انټي باډي سره مینځ ته شوي (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).د سیګنال رنګ غوښتنلیک طرزالعمل د PE فلوروسینس عکس ته د شنه چینل ترتیب کولو سره رامینځته شوی ، او د روښانه ساحې سره.د روښانه ساحې عکس حوالې قطع کول د ماسک په توګه د PE فلوروسینس سیګنال نمونې لپاره پلي شوي.د CD105 پایلې ښودل شوي (شکل 5).
شکل 5: د AdMSCs CD105 پایلې د Countstar Rigel لخوا ټاکل شوي.الف: د FCS ایکسپریس 5 پلس سافټویر لخوا په بیلابیلو نمونو کې د CD105 مثبت فیصدي کمیتي تحلیل.ب: د لوړ کیفیت انځورونه اضافي مورفولوژیکي معلومات چمتو کوي.ج: د هرې حجرې د تمبیلونو په واسطه تایید شوي پایلې، د FCS سافټویر وسیلې حجرې د دوی د مختلف پروټین بیان مطابق په مختلفو ګروپونو ویشلې.
د نورو انټي باډي پایلې په 6 شکل کې ښودل شوي
شکل 6: A: د ASCs نمایندګي انځور د ځانګړي تکلي شکل لرونکي مورفولوژي سره.د OLYMPUS مایکروسکوپ لخوا نیول شوی.اصلي لوړوالی، (10x).ب: د ASCs اډیپوجینک توپیر د روتینیم ریډ سټیننګ لخوا څرګند شوی چې د معدني کولو ساحې ښیې.د OLYMPUS مایکروسکوپ لخوا نیول شوی.اصلي لویوالی (10x).ج: د ASCs د Countstar FL ځانګړتیا.
لنډیز:
د کاونسټار FL کولی شي د دې سټیم حجرو تولید او توپیر پرمهال غلظت ، وړتیا او د فینوټایپ ځانګړتیاوې (او د دوی بدلونونه) وڅاري.د FCS ایکسپریس د هر سیګنال حجرې بیاکتنې لپاره فنکشن چمتو کوي ، د عکس له لارې ډاټا اعتبار کوي.کارونکي کولی شي د کاونسټار ریګل پایلو پراساس راتلونکي تجربې ترسره کولو باور هم ولري.Countstar Rigel د سټیم حجرو د کیفیت کنټرول لپاره ګړندی، پیچلي، او د باور وړ میتود وړاندې کوي.
