Uma amostra contendo células em suspensão é misturada com o corante azul Trypan e, em seguida, extraída para o Countstar Chamber Slide analisado pelo Countstar Automated Cell Counter.Com base no princípio clássico de contagem de células azuis tripan, os instrumentos da Countstar integram tecnologia de imagem óptica avançada, tecnologia de reconhecimento de imagem inteligente e algoritmos de software poderosos para não apenas fornecer a concentração e viabilidade das células, mas também fornecer as informações de concentração de células, viabilidade, taxa de agregação, redondeza , e distribuição de diâmetro com apenas uma corrida.
Análise de células agregadas
Figura 3 Contagem de células agregadas.
A. Imagem da amostra celular;
B. Imagem da amostra celular com marca de identificação do software Countstar BioTech.(Círculo verde: célula viva, círculo amarelo: célula morta, círculo vermelho: célula agregada).
C. Histograma Agregado
Algumas células primárias ou células de subcultura são propensas a agregar quando em mau estado de cultura ou digestão excessiva, causando grande dificuldade na contagem de células.Com a função de calibração de agregação, o Countstar pode realizar um cálculo de estimulação de agregações para garantir uma contagem precisa de células e obter a taxa de agregação e o histograma de agregação, fornecendo assim base para os experimentadores julgarem o estado das células.
Monitoramento do crescimento celular
Figura 4 Curva de crescimento celular.
A curva de crescimento celular é um método comum para medir o crescimento absoluto do número de células, um indicador importante para determinar a concentração celular e um dos parâmetros básicos para a cultura das propriedades biológicas básicas das células.Para descrever com precisão a mudança dinâmica no número de células ao longo de todo o processo, a curva de crescimento típica pode ser dividida em 4 partes: período de incubação com crescimento lento;fase de crescimento exponencial com grande inclinação, fase de platô e período de declínio.A curva de crescimento celular pode ser obtida traçando o número de células vivas (10.000/mL) contra o tempo de cultura (h ou d).
Medindo a Concentração e Viabilidade Celular
Figura 1 As imagens foram capturadas pelo Countstar BioTech à medida que as células (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 e MDCK) em suspensão foram coradas por Trypan Blue, respectivamente.
Countstar é aplicável a células com diâmetro entre 5-180um, como células de mamíferos, células de insetos e alguns plânctons.
Medição do Tamanho da Célula
Figura 2 Medição do tamanho da célula de células CHO antes e depois da transfecção do plasmídeo.
A. Imagens de suspensão de células CHO coradas por azul de tripano antes e depois da transfecção do plasmídeo.
B. Comparação do histograma do tamanho das células CHO antes e depois da transfecção do plasmídeo.
A mudança do tamanho da célula é uma característica fundamental e é comumente medida na pesquisa de células.Normalmente será medido nestes experimentos: transfecção celular, teste de drogas e ensaios de ativação celular.O Countstar fornece dados estatísticos de morfologia, como o tamanho das células, em 20 segundos.
O contador de células automatizado Countstar pode fornecer os dados morfológicos das células, incluindo histogramas de circularidade e diâmetro.
