As células-tronco mesenquimais são um subconjunto de células-tronco pluripotentes que podem ser isoladas do mesoderma.Com suas características de renovação de autorreplicação e diferenciação multidirecional, possuem alto potencial para diversas terapias na medicina.As células-tronco mesenquimais têm um fenótipo imunológico único e capacidade de regulação imunológica.Portanto, as células-tronco mesenquimais já são amplamente utilizadas em transplantes de células-tronco, engenharia de tecidos e transplantes de órgãos.Além dessas aplicações, eles são usados como uma ferramenta ideal na engenharia de tecidos como células semeadoras em uma série de experimentos de pesquisa básica e clínica.
O Countstar Rigel pode monitorar a concentração, viabilidade, análise de apoptose e características do fenótipo (e suas alterações) durante a produção e diferenciação dessas células-tronco.O Countstar Rigel também tem a vantagem de obter informações morfológicas adicionais, fornecidas pelo campo claro permanente e gravações de imagens baseadas em fluorescência durante todo o processo de monitoramento da qualidade das células.O Countstar Rigel oferece um método rápido, sofisticado e confiável para o controle de qualidade de células-tronco.
Viabilidade de Monitoramento de MSCs em Medicina Regenerativa
Figura 1 Monitoramento da viabilidade e contagem de células-tronco mesenquimais (MSCs) para uso em terapias celulares
Stem Cell é um dos tratamentos mais promissores em terapias celulares regenerativas.Da colheita de MSC ao tratamento, é importante manter uma alta viabilidade de células-tronco durante todas as etapas da produção de células-tronco (Figura 1).O contador de células-tronco da Countstar monitora a viabilidade e a concentração das células-tronco para desempenhar um papel crítico no controle de qualidade.
Monitoramento de alterações morfológicas do MSC após o transporte
O diâmetro e a agregação também foram determinados por Countstar Rigel.O diâmetro das AdMSCs foi alterado drasticamente após o transporte quando comparado com antes do transporte.O diâmetro antes do transporte era de 19µm, mas aumentou para 21µm após o transporte.A agregação de antes do transporte foi de 20%, mas aumentou para 25% após o transporte.A partir das imagens capturadas pelo Countstar Rigel, o fenótipo das AdMSCs foi alterado drasticamente após o transporte.Os resultados foram mostrados na Figura 3.
Identificação de AdMSCs no fenótipo celular
Atualmente os procedimentos mínimos de teste de identificação padrão para a garantia da qualidade de CTM monitorados estão listados em uma declaração da Sociedade Internacional de Terapia Celular (ISCT), definida já em 2006.
Detecção Rápida de Apoptose em MSCs com Anexina-V Conjugada FITC e 7-ADD Introdução
A apoptose celular pode ser detectada com anexina-V conjugada com FITC e 7-ADD.Normalmente, o PS é encontrado apenas no folheto intracelular da membrana plasmática em células saudáveis, mas durante a apoptose inicial, a assimetria da membrana é perdida e o PS é translocado para o folheto externo.
Figura 6 Detecção de Apoptose em MSCs por Countstar Rigel
A. Inspeção visual da imagem de fluorescência de Detecção de Apoptose em MSCs
B. Gráficos de dispersão de apoptose em MSCs por FCS expresso
C. Porcentagem da população de células com base em % de células normais, % apoptóticas e % necróticas/apoptóticas em estágio muito avançado.
