Viabilidade de dupla fluorescência (AO/PI), laranja de acridina (AO) e iodeto de propídio (PI) são corantes de coloração nucléica nuclear e corantes de ligação a ácidos.O AO pode penetrar na membrana de células vivas e mortas e mancha o núcleo, gerando uma fluorescência verde.Em contraste, o PI só pode permear as membranas em desintegração de células nucleadas mortas, gerando fluorescência vermelha.A tecnologia baseada em imagem do Countstar Rigel exclui fragmentos de células, detritos e partículas de artefatos, bem como eventos subdimensionados, como plaquetas, proporcionando um resultado altamente preciso.Em conclusão, o sistema Countstar Rigel pode ser usado para todas as etapas do processo de fabricação de células.

Citotoxicidade mediada por células T/NK, na terapia de células CAR-T recentemente aprovada pela FDA, os linfócitos T geneticamente modificados ligam-se especificamente às células cancerígenas (T) alvo e as matam.Os analisadores Countstar Rigel são capazes de analisar este processo completo de citotoxicidade mediada por células T/NK.

Os estudos de citotoxicidade são realizados marcando as células cancerígenas alvo com CFSE ou transfectando-as com GFP.Hoechst 33342 pode ser usado para corar todas as células (tanto células T como células tumorais).Alternativamente, as células tumorais alvo podem ser coradas com CFSE.O iodeto de propídio (PI) é usado para corar células mortas (tanto células T quanto células tumorais).A discriminação entre células diferentes pode ser obtida usando esta estratégia de coloração.

Eficiência de Transfecção GFP, Em genética molecular, vários organismos modelo e biologia celular, o gene GFP é freqüentemente usado como um repórter para estudos de expressão.Atualmente, os cientistas costumam usar microscópios fluorescentes ou citômetros de fluxo para analisar a eficiência de transfecção de células de mamíferos.Mas o manuseio da tecnologia complexa de um citômetro de fluxo avançado exige um operador experiente e altamente qualificado.O Countstar Rigel permite que os usuários realizem com facilidade e precisão um ensaio de eficiência de transfecção sem os custos de operação e manutenção associados à citometria de fluxo tradicional.

Apoptose celular, O progresso da apoptose celular pode ser monitorado usando Anexina-V conjugada com FITC em combinação com 7-ADD.Os resíduos de fosfatidilserina (PS) estão normalmente localizados no lado interno da membrana plasmática de células saudáveis.Durante a apoptose precoce, a integridade da membrana é perdida e o PS será translocado para o exterior da membrana celular.A anexina V tem uma forte afinidade para PS e, portanto, é o marcador ideal para células apoptóticas precoces.

Ciclo celular, Durante a divisão celular, as células contêm quantidades aumentadas de DNA.Marcado por PI, um aumento na intensidade de fluorescência é diretamente proporcional a um acúmulo de DNA.As diferenças nas intensidades de fluorescência das células individuais são os indicadores do estado real do ciclo celular MCF 7 células foram tratadas com 4μM de Nocodazol para prender essas células em diferentes estágios de seu ciclo celular.As imagens de campo claro adquiridas durante este cenário de teste nos permitem identificar cada célula.O canal de fluorescência PI do Countstar Rigel identifica os sinais de DNA de células individuais, mesmo em agregados.Uma análise detalhada das intensidades de fluorescência pode ser realizada usando o FCS.

Fenotipagem de Marcador de CD, Os modelos Countstar Rigel oferecem uma abordagem mais rápida, simples e sensível para fenotipagem imunológica de células mais eficiente.Com imagens de alta resolução e poderosos recursos integrados de análise de dados, o Countstar Rigel permite que os usuários obtenham resultados consistentemente confiáveis ​​sem a necessidade de configurações de controle extensas e complexas e ajustes de compensação de fluorescência.

A diferenciação celular Cytokine Induced Killer (CIK) demonstra a excelente qualidade de desempenho do analisador Countstar Rigel em comparação direta com citômetros de fluxo de alta classe.As PBMCs de camundongo em cultura foram coradas com CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE e CD56-PE e induzidas por Interleucina (IL) 6. Em seguida, analisadas simultaneamente com Countstar® Rigel e Citometria de Fluxo.Neste teste, o CD3-CD4, o CD3-CD8 e o CD3-CD56 foram divididos em três grupos, para determinar a proporção de diferentes subpopulações celulares.

Detecção de células degeneradas por imunofluorescência, linhagens celulares produtoras de anticorpos monoclonais perderão alguns clones positivos durante a proliferação celular e passagem devido à degradação ou mutações genéticas.Uma perda maior afetará significativamente a produtividade do processo de fabricação.O monitoramento da degradação desempenha um papel importante no controle do processo para mudar o rendimento de anticorpos para o ótimo.

A maioria dos anticorpos fabricados na indústria BioPharma podem ser detectados por rotulagem de imunofluorescência e analisados ​​quantitativamente pela série Countstar Rigel.As imagens de campo claro e de canal de fluorescência abaixo mostram claramente os clones que perderam seu atributo para produzir os anticorpos desejados.A análise mais detalhada com o software DeNovo FCS Express Image confirma que 86,35% de todas as células expressam as imunoglobulinas, apenas 3,34% são claramente negativas.

Contagem de células Trypan (capitalize B em azul) A coloração com azul de Trypan ainda é usada na maioria dos laboratórios de cultura de células.

O Trypan Blue Viability e Cell Density BioApp pode ser instalado em todos os modelos Countstar Rigel.Nossos algoritmos de reconhecimento de imagem protegidos analisam mais de 20 parâmetros para classificar cada objeto detectado.

Cell Line Storage QC, No armazenamento celular, um conceito sofisticado de gerenciamento de qualidade garante o monitoramento seguro e eficiente de todos os produtos celulares.Isso garante a qualidade estável das células criopreservadas, criopreservadas para experimentos, desenvolvimento de processos e produção.

O Countstar Rigel adquire imagens de alta resolução, analisando várias características morfológicas dos objetos celulares, como diâmetro, forma e tendência de agregação.Imagens de diferentes etapas do processo podem ser facilmente comparadas entre si.Assim, variações na forma e agregação podem ser facilmente detectadas, evitando medições humanas subjetivas.E o banco de dados Countstar Rigel possui um sofisticado sistema de gerenciamento para armazenamento e recuperação de imagens e dados.