O probă care conține celule în suspensie se amestecă cu colorant albastru Trypan, apoi este trasă în diapozitivul Countstar Chamber analizat de Countstar Automated Cell Counter.Pe baza principiului clasic de numărare a celulelor trypan blue, instrumentele Countstar integrează tehnologie avansată de imagistică optică, tehnologie inteligentă de recunoaștere a imaginii și algoritmi software puternici pentru a oferi nu numai concentrația și viabilitatea celulelor, dar și informații despre concentrația celulei, viabilitate, rata de agregare, rotunjime. , și distribuția diametrului cu o singură trecere.
Analiza celulară agregată
Figura 3 Numărarea celulelor agregate.
A. Imaginea probei de celule;
B. Imaginea probei celulare cu marca de identificare de către software-ul Countstar BioTech.(Cercul verde: celulă vie, Cercul galben: celulă moartă, Cercul roșu: celulă agregată).
C. Histograma agregată
Unele celule primare sau celule de subcultură sunt predispuse la agregare atunci când starea proastă a culturii sau o digestie excesivă, provocând astfel mari dificultăți în numărarea celulelor.Cu funcția de calibrare a agregării, Countstar poate realiza un calcul de stimulare a agregărilor pentru a asigura o numărare precisă a celulelor și pentru a obține rata de agregare și histograma de agregare, oferind astfel baza pentru experimentatori pentru a judeca starea celulelor.
Monitorizarea creșterii celulare
Figura 4 Curba de creștere a celulelor.
Curba de creștere celulară este o metodă comună de măsurare a creșterii absolute a numărului de celule, un indicator important pentru determinarea concentrației celulare și unul dintre parametrii de bază pentru cultura proprietăților biologice de bază ale celulelor.Pentru a descrie cu exactitate schimbarea dinamică a numărului de celule pe parcursul întregului proces, curba tipică de creștere poate fi împărțită în 4 părți: perioada de incubație cu creștere lentă;faza de crestere exponentiala cu panta mare, faza de platou si perioada de declin.Curba de creștere celulară poate fi obținută prin reprezentarea grafică a numărului de celule vii (10.000/mL) în funcție de timpul de cultură (h sau d).
Măsurarea concentrației celulare și a viabilității
Figura 1 Imaginile au fost capturate de Countstar BioTech, deoarece celulele (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 și MDCK) în suspensie au fost colorate cu Trypan Blue.
Countstar este aplicabil celulelor cu diametrul între 5-180um, cum ar fi celula de mamifer, celula de insectă și unele planctonuri.
Măsurarea dimensiunii celulei
Figura 2 Măsurarea dimensiunii celulelor celulelor CHO înainte și după transfecția plasmidei.
A. Imagini ale suspensiei de celule CHO colorate cu albastru tripan înainte și după transfecția plasmidei.
B. Compararea histogramei mărimii celulei CHO înainte și după transfecția plasmidei.
Modificarea dimensiunii celulei este o caracteristică cheie și este măsurată în mod obișnuit în cercetarea celulelor.În mod normal, acesta va fi măsurat în aceste experimente: transfecție celulară, test de droguri și teste de activare celulară.Countstar oferă date statistice de morfologie, cum ar fi dimensiunile celulelor, în 20 de secunde.
Contorul automat de celule Countstar poate oferi date morfologice ale celulelor, inclusiv histograme de circularitate și diametru.