Мезенхимальные стволовые клетки представляют собой подмножество плюрипотентных стволовых клеток, которые можно выделить из мезодермы.Обладая характеристиками саморепликации и многонаправленной дифференцировки, они обладают высоким потенциалом для различных методов лечения в медицине.Мезенхимальные стволовые клетки обладают уникальным иммунным фенотипом и способностью к иммунной регуляции.Поэтому мезенхимальные стволовые клетки уже широко используются в трансплантации стволовых клеток, тканевой инженерии и трансплантации органов.И помимо этих приложений, они используются в качестве идеального инструмента в тканевой инженерии в качестве затравочных клеток в серии фундаментальных и клинических исследовательских экспериментов.
может контролировать концентрацию, жизнеспособность, анализ апоптоза и характеристики фенотипа (и их изменения) во время производства и дифференцировки этих стволовых клеток. также имеет преимущество в получении дополнительной морфологической информации, обеспечиваемой постоянным светлым полем и записью изображений на основе флуоресценции в течение всего процесса мониторинга качества клеток. предлагает быстрый, сложный и надежный метод контроля качества стволовых клеток.
Мониторинг жизнеспособности МСК в регенеративной медицине
Рисунок 1 Мониторинг жизнеспособности и количества клеток мезенхимальных стволовых клеток (МСК) для использования в клеточной терапии
Стволовые клетки — один из самых многообещающих методов регенеративной клеточной терапии.От сбора МСК до лечения важно поддерживать высокую жизнеспособность стволовых клеток на всех этапах производства стволовых клеток (рис. 1).Счетчик стволовых клеток контролирует жизнеспособность и концентрацию стволовых клеток, что играет решающую роль в контроле качества.
Мониторинг морфологических изменений МСК после транспортировки
Диаметр и агрегацию также определяли с помощью .Диаметр AdMSC резко изменился после транспортировки по сравнению с до транспортировки.Диаметр до транспортировки составлял 19 мкм, но после транспортировки он увеличился до 21 мкм.Агрегация до транспортировки составляла 20%, но после транспортировки она возрастала до 25%.Судя по изображениям, полученным с помощью , фенотип AdMSC резко изменился после транспортировки.Результаты представлены на рисунке 3.
Идентификация AdMSCs в клеточном фенотипе
В настоящее время минимальные стандартные процедуры идентификации для обеспечения качества контролируемых МСК перечислены в заявлении Международного общества клеточной терапии (ISCT), принятом еще в 2006 году.
Быстрое обнаружение апоптоза в МСК с FITC-конъюгированным аннексином-V и 7-ADD Введение
Апоптоз клеток можно обнаружить с помощью FITC-конъюгированного аннексина-V и 7-ADD.ФС в норме обнаруживается только на внутриклеточном листке плазматической мембраны здоровых клеток, но во время раннего апоптоза асимметрия мембраны утрачивается и ФС перемещается на наружный листок.
Рисунок 6. Обнаружение апоптоза в МСК с помощью Countstar Rigel
А. Визуальный осмотр флуоресцентного изображения обнаружения апоптоза в МСК.
B. Графики рассеяния апоптоза в МСК с помощью FCS Express.
C. Процент клеточной популяции на основе % нормальных, % апоптотических и % некротических/апоптотических клеток на очень поздней стадии.
