Иммуно-фенотипический анализ является типичным экспериментом, проводимым в областях исследований, связанных с клетками, для диагностики различных заболеваний (аутоиммунных заболеваний, иммунодефицитных состояний, диагностики опухолей, гемостаза, аллергических заболеваний и многих других) и патологии заболеваний.Его также можно использовать для проверки качества клеток в исследованиях различных клеточных заболеваний.Проточная цитометрия и флуоресцентный микроскоп являются рутинными методами анализа в научно-исследовательских институтах клеточных заболеваний, которые используются для иммунофенотипирования.Но эти методы анализа могут предоставлять только изображения или ряды данных, которые могут не соответствовать строгим требованиям к одобрению со стороны регулирующих органов.
M Dominici el, Cytotherapy (2006) Vol.8, № 4, 315-317
Идентификация иммунофенотипа AdMSCs
Иммунофенотип AdMSC определяли с помощью FL, AdMSC инкубировали с различными антителами соответственно (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 и HLADR).Процедура применения сигнального цвета была создана путем установки зеленого канала для изображения флуоресценции PE плюс светлое поле.Эталонная сегментация изображения в светлом поле применялась в качестве маски для выборки флуоресцентного сигнала PE.Были показаны результаты CD105 (Фигура 1).
Рисунок 1. Идентификация иммунофенотипа AdMSC.A. Яркое поле и флуоресцентное изображение AdMSCs;B. Обнаружение AdMSC с помощью маркера CD с помощью FL
Контроль качества MSC – проверка результатов для каждой отдельной клетки
Рисунок 2 A: Результаты FL были отображены в FCS Express 5plus, с гейтированием положительного процента CD105 и отдельными клетками обзорной таблицы.B: Скорректированный гейт с правой стороны, изображения таблицы отдельных клеток показывают клетки с высокой экспрессией CD105.C: скорректированный стробирование влево, изображения таблицы одиночных клеток показывают клетки с низкой экспрессией CD105.
Фенотипические изменения во время транспортировки
Рисунок 3. A: Количественный анализ положительного процента CD105 в различных образцах с помощью программного обеспечения FCS Express 5 plus.B: Изображения высокого качества предоставляют дополнительную морфологическую информацию.C: подтвержденные результаты миниатюрами каждой отдельной ячейки, программные инструменты FCS разделили ячейки на разные