Biologické a génové terapie založené na AAV získavajú väčší podiel na trhu pri liečbe chorôb.Avšak vývoj robustnej a účinnej cicavčej bunkovej línie na ich produkciu je náročný a zvyčajne vyžaduje rozsiahlu bunkovú charakterizáciu.Historicky sa v týchto bunkových testoch používa prietokový cytometer.Prietokový cytometer je však relatívne drahý a vyžaduje rozsiahle školenie na obsluhu aj údržbu.Nedávno, s nárastom výpočtových schopností a vysokokvalitných kamerových senzorov, bola inovovaná cytometria založená na obrázku, aby poskytla presnú a nákladovo efektívnu alternatívu pre vývoj bunkových línií.V tejto práci sme opísali pracovný postup vývoja bunkovej línie zahŕňajúci cytometer založený na obrázku, menovite Countstar Rigel, na hodnotenie účinnosti transfekcie a vyhodnotenie stabilného súboru s použitím buniek CHO a HEK293 exprimujúcich protilátku a vektor rAAV.V dvoch prípadových štúdiách sme preukázali:
- Countstar Rigel poskytoval podobnú presnosť detekcie ako prietoková cytometria.
- Hodnotenie skupiny založené na Countstar Rigel môže pomôcť určiť požadovanú skupinu pre jednobunkové klonovanie (SCC).
- Platforma na vývoj bunkovej línie začlenená Countstar Rigel dosiahla titer 2,5 g/l mAb.
Diskutovali sme aj o možnosti použitia Countstar ako ďalšej vrstvy optimalizačného cieľa založeného na rAAV DoE.
pre viac podrobností si stiahnite súbor PDF.
