Viabilnost z dvojno fluorescenco (AO/PI), akridin pomaranča (AO) in propidijev jodid (PI) so jedrsko nukleinsko obarvanje in barvila, ki vežejo kislino.AO lahko prodre skozi membrano tako mrtvih kot živih celic in obarva jedro, kar povzroči zeleno fluorescenco.Nasprotno pa lahko PI prodre samo v razpadajoče membrane mrtvih celic z jedri, kar ustvarja rdečo fluorescenco.Tehnologija Countstar Rigel, ki temelji na slikah, izključuje drobce celic, ostanke in delce artefaktov ter manjše dogodke, kot so trombociti, kar daje zelo natančen rezultat.Skratka, sistem Countstar Rigel se lahko uporablja za vse korake procesa izdelave celic.

Citotoksičnost, posredovana s celicami T/NK. V nedavno odobreni celični terapiji CAR-T, ki jo je odobrila FDA, se gensko spremenjeni T-limfociti specifično vežejo na ciljne rakave celice (T) in jih ubijejo.Analizatorji Countstar Rigel lahko analizirajo ta celoten proces citotoksičnosti, posredovane s celicami T/NK.

Študije citotoksičnosti se izvajajo z označevanjem ciljnih rakavih celic s CFSE ali transfekcijo z GFP.Hoechst 33342 se lahko uporablja za obarvanje vseh celic (tako T celic kot tumorskih celic).Alternativno lahko ciljne tumorske celice obarvamo s CFSE.Propidijev jodid (PI) se uporablja za obarvanje mrtvih celic (tako T celic kot tumorskih celic).S to strategijo obarvanja je mogoče doseči razlikovanje med različnimi celicami.

Učinkovitost transfekcije GFP, V molekularni genetiki, različnih modelnih organizmih in celični biologiji se gen GFP pogosto uporablja kot poročevalec za študije ekspresije.Trenutno znanstveniki običajno uporabljajo fluorescenčne mikroskope ali pretočne citometre za analizo učinkovitosti transfekcije celic sesalcev.Toda ravnanje s kompleksno tehnologijo naprednega pretočnega citometra zahteva izkušenega in visoko usposobljenega operaterja.Countstar Rigel uporabnikom omogoča enostavno in natančno izvedbo testa učinkovitosti transfekcije brez stroškov delovanja in vzdrževanja, povezanih s tradicionalno pretočno citometrijo.

Celična apoptoza. Napredek celične apoptoze je mogoče spremljati z uporabo FITC konjugiranega aneksina-V v kombinaciji s 7-ADD.Ostanki fosfatidilserina (PS) se običajno nahajajo na notranji strani plazemske membrane zdravih celic.Med zgodnjo apoptozo se celovitost membrane izgubi in PS se bo preselil na zunanjo stran celične membrane.Aneksin V ima močno afiniteto do PS in je zato idealen marker za zgodnje apoptotične celice.

Celični cikel, med celično delitvijo celice vsebujejo povečane količine DNK.Povečanje intenzivnosti fluorescence, označeno s PI, je neposredno sorazmerno s kopičenjem DNK.Razlike v intenzivnosti fluorescence posameznih celic so kazalniki dejanskega stanja celičnega cikla. Celice MCF 7 so bile obdelane s 4 μM nokodazola, da bi te celice zaustavile v različnih fazah njihovega celičnega cikla.Slike svetlega polja, pridobljene med tem testnim scenarijem, nam omogočajo, da identificiramo vsako posamezno celico.PI fluorescenčni kanal Countstar Rigel identificira signale DNK posameznih celic celo v agregatih.Podrobno analizo intenzivnosti fluorescence je mogoče izvesti z uporabo FCS.

Fenotipizacija CD markerjev, modeli Countstar Rigel ponujajo hitrejši, enostavnejši in bolj občutljiv pristop k učinkovitejši imunski osnovi fenotipizacije celic.S slikami visoke ločljivosti in zmogljivimi integriranimi zmogljivostmi analize podatkov omogoča Countstar Rigel uporabnikom doseganje dosledno zanesljivih rezultatov brez potrebe po obsežnih kompleksnih nastavitvah nadzora in prilagoditvah kompenzacije fluorescence.

Diferenciacija celic, ki jih povzroča citokini ubijalec (CIK), dokazuje izjemno kakovost delovanja analizatorja Countstar Rigel v neposredni primerjavi s pretočnimi citometri visokega razreda.PBMC miši v kulturi so bili obarvani s CD3-FITC, CD4-PE, CD8-PE in CD56-PE ter inducirani z interlevkinom (IL) 6. Nato so analizirani istočasno s Countstar® Rigel in pretočno citometrijo.V tem testu so bili CD3-CD4, CD3-CD8 in CD3-CD56 razdeljeni v tri skupine, da bi določili delež različnih celičnih subpopulacij.

Odkrivanje degeneriranih celic z imunofluorescenco, monoklonska protitelesa, ki proizvajajo celične linije, bodo med celično proliferacijo in prehodom izgubila nekaj pozitivnih klonov zaradi razgradnje ali genetskih mutacij.Večja izguba bo bistveno vplivala na produktivnost proizvodnega procesa.Spremljanje razgradnje igra pomembno vlogo pri nadzoru procesa, da se izkoristek protiteles premakne na optimalno.

Večino protiteles, proizvedenih v industriji BioPharma, je mogoče odkriti z imunofluorescenčnim označevanjem in kvantitativno analizirati s serijo Countstar Rigel.Spodnje slike svetlega polja in fluorescenčnega kanala jasno prikazujejo tiste klone, ki so izgubili svoj atribut za proizvodnjo želenih protiteles.Podrobnejša analiza s programsko opremo DeNovo FCS Express Image potrjuje, da 86,35 % vseh celic izraža imunoglobuline, le 3,34 % je očitno negativnih.

Trypan (v modro črko B) Štetje celic, obarvanje Trypan modro se še vedno uporablja v večini laboratorijev celične kulture.

Trypan Blue Viability and Cell Density BioApp je mogoče namestiti na vse modele Countstar Rigel.Naši zaščiteni algoritmi za prepoznavanje slik analizirajo več kot 20 parametrov, da razvrstijo vsak posamezen zaznan predmet.

Cell Line Storage QC, pri shranjevanju celic prefinjen koncept upravljanja kakovosti zagotavlja varno in učinkovito spremljanje vseh celičnih izdelkov.To zagotavlja stabilno kakovost kriokonzerviranih celic, kriokonzerviranih za eksperimente, razvoj procesov in proizvodnjo.

Countstar Rigel pridobi slike visoke ločljivosti, pri čemer analizira različne morfološke značilnosti celičnih objektov, kot so premer, oblika in nagnjenost k združevanju.Slike različnih procesnih korakov je mogoče enostavno primerjati med seboj.Tako je mogoče zlahka zaznati razlike v obliki in združevanju, tako da se izognemo subjektivnim človeškim meritvam.Baza podatkov Countstar Rigel ima sofisticiran sistem upravljanja za shranjevanje in pridobivanje slik in podatkov.