Soo koobid: Unugyada asliga ee Mesenchymal waa qayb hoosaadyo unugyo tarma oo pluripotent ah oo laga sooci karo mesoderm-ka.Dib-u-cusboonaysiintooda is-ku-noqoshada iyo sifooyinka kala duwanaanta jihooyinka badan, waxay leeyihiin awood sare oo daaweyn kala duwan oo daawada ah.Unugyada asliga ee Mesenchymal waxay leeyihiin phenotype difaac gaar ah iyo awoodda nidaaminta difaaca.Sidaa darteed, unugyada tarma ee mesenchymal ayaa durba si weyn loogu isticmaalay ku-tallaalidda unugyada asliga ah, injineernimada unugyada, iyo tallaalka xubnaha.Marka laga soo tago codsiyadan, waxaa loo isticmaalaa sidii qalab ku habboon injineernimada unugyada sida unugyo seeder ah oo taxane ah oo cilmi-baaris aasaasi ah iyo mid caafimaad.Ilaa hadda, ma jiro hab iyo halbeeg si weyn loo aqbalay oo lagu xakameynayo tayada unugyada tarma ee mesenchymal.Countstar Rigel waxa ay la socon kartaa feejignaanta, jiritaanka, iyo astaamaha phenotype (iyo isbedeladooda) inta lagu jiro wax soo saarka iyo kala soocida unugyada asliga ah.Countstar Rigel ayaa sidoo kale faa'iido u leh helitaanka macluumaad dheeraad ah oo qaab-dhismeedka, oo ay bixiso goobta dhalaalaysa ee joogtada ah iyo duubista muuqaalka ku salaysan fluorescence inta lagu jiro dhammaan habka kormeerka tayada unugyada.Countstar Rigel wuxuu bixiyaa hab degdeg ah, casri ah, oo la isku halayn karo oo loogu talagalay xakamaynta tayada unugyada asliga ah.
Qalabka iyo hababka:
Unugyada stem mesenchymal ee adipose-derived mesenchymal (AdMSCs) waxaa hibo u siiyay Professor Nianmin Qi, AO/PI xalinta midabaynta (Shanghai RuiYu, CF002).Antibody: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (Shirkadda BD).
AdMSC-yada waxaa lagu dhaqan geliyay 37 ℃, 5% CO2 humidified incubator.Ku dar trypsin ka hor inta aan la isticmaalin.
Habka sumaynta CD-ga ayaa loo raacay sidii buug-gacmeedka antibody.
Ogaanshaha calaamadeeyaha CD-ga ee Countstar Rigel:
1. Nidaamka codsiga midabka calaamadda ayaa la sameeyay iyadoo la dejinayo kanaalka PE si loo sawiro PE fluorescence.
2. 3 beerood ayaa qol walba laga qabsaday.
3. Ka dib markii sawir-qaadista iyo falanqaynta bilawga ahi dhammaatay, marinka (log gate) ee dejinta wareejinta togan iyo tan taban waxaa dejiyay software-ka FCS.
Xakamaynta tayada unugyada asliga ah
Jaantuska soo socda (Jaantuska 1) wuxuu muujinayaa habka daaweynta unugyada stem .
Jaantuska 1: Habka daaweynta unugyada asliga ah
Natiijooyinka:
Go'aaminta u-fiirsashada, jiritaanka, dhexroorka, iyo isku-darka AdMSC-yada.
Jiritaanka AdMSC-yada waxaa go'aamiyay AO/PI, Nidaamka codsiga laba-midab waxaa la sameeyay iyadoo la dejinayo kanaalka Cagaaran iyo kan cas si loo sawiro AO iyo fluorescence PI, oo lagu daray goob dhalaalaya.Sawirro tusaale ah ayaa lagu muujiyey sawirka 2.
Jaantuska 2. Sawirada ka hor gaadiidka iyo ka dib gaadiidka AdMSCs.A. Ka hor inta aan la qaadin;sawir wakiil ah ayaa la muujiyay.B. Gaadiidka ka dib;sawir wakiil ah ayaa la muujiyay.
Suurtogalnimada AdMSC-yada si aad ah ayaa loo beddelay gaadiidka ka dib marka la barbar dhigo ka hor gaadiidka.Suurtogalnimada ka hor gaadiidka waxay ahayd 92%, laakiin waxay hoos ugu dhacday 71% gaadiidka ka dib.Natiijada waxaa lagu muujiyay sawirka 3.
Jaantuska 3. Natiijooyinka suurtagalka ah ee AdMSCs (kahor gaadiidka iyo ka dib gaadiidka)
Dhexroorka iyo isku geynta ayaa sidoo kale waxaa go'aamiyay Countstar Rigel.Dhexroorka AdMSC-yada ayaa si aad ah loo beddelay gaadiidka ka dib marka la barbar dhigo ka hor gaadiidka.Dhexroorka ka hor gaadiidka wuxuu ahaa 19µm, laakiin wuxuu kordhay ilaa 21µm gaadiidka ka dib.Isku darka gaadiidka ka hor wuxuu ahaa 20%, laakiin wuxuu kordhay ilaa 25% gaadiidka ka dib.Laga soo bilaabo sawirada uu qabtay Countstar Rigel, nooca phenotype ee AdMSCs ayaa si aad ah loo bedelay gaadiidka ka dib.Natiijooyinka waxaa lagu muujiyay sawirka 4.
Jaantuska 4: Dhexroorka iyo natiijooyinka isku-darka.J: Sawirrada matala AdMSCs, nooca phenotype ee AdMSCs ayaa si aad ah loo bedelay gaadiidka ka dib.B: Isku geynta ka hor inta aan la qaadin waxay ahayd 20%, laakiin waxay korodhay ilaa 25% gaadiidka ka dib.C: Dhexroorka ka hor gaadiidka wuxuu ahaa 19µm, laakiin wuxuu kordhay ilaa 21µm gaadiidka ka dib.
Go'aami nooca difaaca jirka ee AdMSCs ee Countstar Rigel
Nooca difaaca jirka ee AdMSCs waxaa go'aamiyay Countstar Rigel, AdMSC-yada waxaa lagu galiyay antibody kala duwan siday u kala horreeyaan (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).Nidaamka codsiga midabka calaamadda ayaa la sameeyay iyadoo la dejinayo kanaalka cagaaran si loo sawiro PE fluorescence, oo lagu daray goob dhalaalaya.Qaybta tixraaca sawirka bannaanka ee dhalaalaya ayaa loo adeegsaday sidii maaskaro si loo muunado calaamadda fluorescence ee PE.Natiijooyinka CD105 ayaa la muujiyay (Jaantuska 5).
Jaantus 5: Natiijooyinka CD105 ee AdMSCs waxaa go'aamiyay Countstar Rigel.J: Falanqaynta tirada ee boqolkiiba togan ee CD105 ee muunado kala duwan oo ay samaysay FCS express 5 iyo software.B: Sawirro tayo sare leh ayaa bixiya macluumaad maskaxeed oo dheeraad ah.C: Natiijooyinka thumbnails ee unug kasta oo la xaqiijiyay, aaladaha software-ka FCS waxay unugyada u qaybiyeen kooxo kala duwan iyadoo loo eegayo muujinta borotiinka ee kala duwan.
Natiijooyinka unugyada difaaca jirka ee kale ayaa lagu muujiyay sawirka 6
Jaantuska 6: A: Sawirka ASC-yada oo leh qaab-dhismeedka spinal-ka ee caadiga ah.Waxaa qabsaday mikroskoob OLYMPUSWeynaynta asalka ah, (10x).B: Kala soocida adipogenic ee ASCs waxaa caddaynaya midabaynta Ruthenium Red oo muujinaysa meelaha macdanta.Waxaa qabsaday mikroskoob OLYMPUSWeynaynta asalka ah (10x).C: Tilmaamaha Countstar FL ee ASCs.
Soo koobid:
Countstar FL waxa ay la socon kartaa fiirsiga, jiritaanka, iyo astaamaha phenotype (iyo isbedeladooda) inta lagu jiro soo saarida iyo kala soocida unugyada asliga ah.FCS waxay muujisaa waxay bixisaa shaqada si ay dib ugu eegto unug kasta oo calaamad ah, ku ansixiya xogta sawirka.Isticmaaluhu wuxuu kaloo yeelan karaa kalsoonida uu ku sameeyo tijaabooyinka xiga ee ku salaysan natiijooyinka Countstar Rigel.Countstar Rigel wuxuu bixiyaa hab degdeg ah, casri ah, oo la isku halayn karo oo loogu talagalay xakamaynta tayada unugyada asliga ah.
