Виабилност двоструке флуоресценције (АО/ПИ), акридин наранџаста (АО) и пропидијум јодид (ПИ) су боје за нуклеарно нуклеинско бојење и боје које везују киселину.АО може да продре кроз мембрану и мртвих и живих ћелија и да обоји језгро, стварајући зелену флуоресценцију.Насупрот томе, ПИ може да продре само кроз мембране мртвих ћелија са језгром, стварајући црвену флуоресценцију.Технологија Цоунтстар Ригел-а заснована на сликама искључује ћелијске фрагменте, остатке и честице артефаката, као и догађаје мале величине као што су тромбоцити, дајући веома прецизан резултат.У закључку, Цоунтстар Ригел систем се може користити за сваки корак процеса производње ћелија.
Цитотоксичност посредована Т/НК ћелијама, У недавно одобреној ЦАР-Т ћелијској терапији, генетски модификовани Т-лимфоцити се специфично везују за циљане ћелије рака (Т) и убијају их.Цоунтстар Ригел анализатори су у стању да анализирају овај комплетан процес цитотоксичности посредоване Т/НК ћелијама.
Студије цитотоксичности се изводе обележавањем циљних ћелија рака са ЦФСЕ или њиховим трансфекцијом са ГФП.Хоецхст 33342 се може користити за бојење свих ћелија (и Т ћелија и туморских ћелија).Алтернативно, циљне туморске ћелије могу бити обојене ЦФСЕ.Пропидијум јодид (ПИ) се користи за бојење мртвих ћелија (и Т ћелија и туморских ћелија).Користећи ову стратегију бојења може се постићи дискриминација између различитих ћелија.
Ефикасност ГФП трансфекције, У молекуларној генетици, различитим моделним организмима и ћелијској биологији, ГФП ген се често користи као репортер за студије експресије.Тренутно научници обично користе флуоресцентне микроскопе или проточне цитометре за анализу ефикасности трансфекције ћелија сисара.Али руковање сложеном технологијом напредног проточног цитометра захтева искусног и високо квалификованог оператера.Цоунтстар Ригел омогућава корисницима да лако и прецизно изврше тест ефикасности трансфекције без трошкова рада и одржавања повезаних са традиционалном проточном цитометријом.
Апоптоза ћелије. Напредак ћелијске апоптозе се може пратити коришћењем ФИТЦ коњугованог Анексина-В у комбинацији са 7-АДД.Остаци фосфатидилсерина (ПС) се нормално налазе на унутрашњој страни плазма мембране здравих ћелија.Током ране апоптозе, интегритет мембране се губи и ПС ће бити пребачен на спољашњу страну ћелијске мембране.Анексин В има јак афинитет према ПС и стога је идеалан маркер за ране апоптотичке ћелије.
Ћелијски циклус, током ћелијске деобе, ћелије садрже повећане количине ДНК.Означено са ПИ, повећање интензитета флуоресценције је директно пропорционално акумулацији ДНК.Разлике у интензитету флуоресценције појединачних ћелија су индикатори стварног статуса ћелијског циклуса МЦФ 7 ћелије су третиране са 4 μМ нокодазола да би се ове ћелије зауставиле у различитим фазама њиховог ћелијског циклуса.Слике светлог поља добијене током овог тестног сценарија омогућавају нам да идентификујемо сваку појединачну ћелију.ПИ флуоресцентни канал Цоунтстар Ригел идентификује ДНК сигнале појединачних ћелија чак и у агрегатима.Детаљна анализа интензитета флуоресценције може се извршити коришћењем ФЦС.
Фенотипизација ЦД маркера, Цоунтстар Ригел модели нуде бржи, једноставнији и осетљивији приступ ефикаснијој имуно-базираној фенотипизацији ћелија.Са сликама високе резолуције и моћним могућностима интегрисане анализе података, Цоунтстар Ригел омогућава корисницима да постигну доследно поуздане резултате без потребе за опсежним сложеним подешавањима контроле и прилагођавањем компензације флуоресценције.
Диференцијација ћелија индукованих убица цитокином (ЦИК) показује изузетан квалитет перформанси Цоунтстар Ригел анализатора у директном поређењу са проточним цитометрима високе класе.ПБМЦ миша у култури су обојени са ЦД3-ФИТЦ, ЦД4-ПЕ, ЦД8-ПЕ и ЦД56-ПЕ и индуковани интерлеукином (ИЛ) 6. Затим су анализирани истовремено са Цоунтстар® Ригел и проточном цитометријом.У овом тесту, ЦД3-ЦД4, ЦД3-ЦД8 и ЦД3-ЦД56 су подељени у три групе, да би се одредио удео различитих субпопулација ћелија.
Детекција дегенерисаних ћелија имунофлуоресценцијом, моноклонска антитела која производе ћелијске линије ће изгубити неке позитивне клонове током ћелијске пролиферације и проласка услед деградације или генетских мутација.Већи губитак ће значајно утицати на продуктивност производног процеса.Праћење деградације игра важну улогу у контроли процеса како би се принос антитела померио на оптималан ниво.
Већина антитела произведених у индустрији БиоПхарма може се детектовати имунофлуоресцентним обележавањем и квантитативно анализирати помоћу серије Цоунтстар Ригел.Слике светлог поља и канала флуоресценције испод јасно показују оне клонове који су изгубили свој атрибут да производе жељена антитела.Детаљнија анализа са ДеНово ФЦС Екпресс Имаге софтвером потврђује да 86,35% свих ћелија експримира имуноглобулине, само 3,34% је јасно негативно.
Трипан (плаво писати великим словом Б) Бројање ћелија, бојење трипан плавом се и даље користи у већини лабораторија ћелијске културе.
Трипан Блуе Виабилити анд Целл Денсити БиоАпп се може инсталирати на све Цоунтстар Ригел моделе.Наши заштићени алгоритми за препознавање слика анализирају више од 20 параметара како би класификовали сваки откривени објекат.
КЦ складиштења у ћелијској линији, у складишту ћелија, софистицирани концепт управљања квалитетом обезбеђује безбедно, ефикасно праћење свих ћелијских производа.Ово гарантује стабилан квалитет ћелија криоконзервираних, крио-конзервираних за експерименте, развој процеса и производњу.
Цоунтстар Ригел добија слике високе резолуције, анализирајући различите морфолошке карактеристике ћелијских објеката као што су пречник, облик и тенденција агрегације.Слике различитих корака процеса могу се лако упоредити једна са другом.Тако да се варијације у облику и агрегацији могу лако открити избегавањем субјективних људских мерења.База података Цоунтстар Ригел има софистицирани систем управљања за складиштење и преузимање слика и података.
Користимо колачиће да бисмо побољшали ваше искуство када посећујете наше веб странице: колачићи за перформансе нам показују како користите ову веб локацију, функционални колачићи памте ваша подешавања, а колачићи за циљање нам помажу да делимо садржај релевантан за вас.