Kuchambua leukocytes katika damu nzima ni uchunguzi wa kawaida katika maabara ya kliniki au benki ya damu.Mkusanyiko na uwezekano wa leukocytes ni kiashiria muhimu kama udhibiti wa ubora wa uhifadhi wa damu.Mbali na leukocyte, damu nzima ina idadi kubwa ya sahani, seli nyekundu za damu, au uchafu wa seli, ambayo inafanya kuwa haiwezekani kuchambua damu nzima moja kwa moja chini ya darubini au kaunta ya seli ya uwanja mkali.Mbinu za kawaida za kuhesabu chembechembe nyeupe za damu zinahusisha mchakato wa uchanganuzi wa RBC, ambao unatumia muda mwingi.
Hesabu ya AOPI-fluoresces mbili ni aina ya kipimo kinachotumiwa kutambua ukolezi wa seli na uwezo wake wa kufanya kazi.Suluhisho ni mchanganyiko wa akridine chungwa (doa ya kijani-fluorescent ya asidi ya nucleic) na iodidi ya propidium (doa la asidi ya nukleiki nyekundu-fluorescent).Propidium iodide (PI) ni rangi ya kutengwa kwa utando ambayo huingia tu kwenye seli zilizo na utando ulioathiriwa, huku chungwa la akridine linaweza kupenya seli zote katika idadi ya watu.Wakati rangi zote mbili zipo kwenye kiini, iodidi ya propidium husababisha kupunguzwa kwa fluorescence ya chungwa ya akridine kwa uhamishaji wa nishati ya mwanga wa fluorescence (FRET).Kwa hivyo, seli zilizo na nuklea zilizo na utando mzima huchafua kijani kibichi na huhesabiwa kuwa hai, ilhali seli zilizo na nuklea zilizo na utando ulioathiriwa huchafua tu nyekundu ya flora na huhesabiwa kuwa zimekufa wakati wa kutumia mfumo wa Countstar® Rigel.
Countstar Rigel ni suluhisho bora kwa majaribio mengi changamano ya tabia ya seli, kuwezesha kuchanganua kwa haraka seli nyeupe za damu katika damu nzima.
Utaratibu wa Majaribio:
1. Chukua 20 µl za sampuli ya damu na unyunyue sampuli katika 180 µl ya PBS.
2.Ongeza suluhisho la 12µl AO/PI kwenye sampuli ya 12µl, iliyochanganywa kwa upole na pipette;
3.Chora mchanganyiko wa 20µl kwenye slaidi ya chumba;
4.Ruhusu seli zitulie kwenye chumba kwa takriban dakika 1;
5.Weka slaidi kwenye chombo cha Countstar FL;
6.Chagua jaribio la "Uwezo wa AO/PI", kisha Uweke Sampuli ya Kitambulisho cha sampuli hii.
7.Chagua uwiano wa Dilution, Aina ya Seli, bonyeza 'Run' ili kuanza jaribio.
Tahadhari: AO na PI ni kansa inayoweza kutokea.Inapendekezwa kuwa opereta avae vifaa vya kinga ya kibinafsi (PPE) ili kuzuia kugusa ngozi na macho moja kwa moja.
Matokeo:
1. Picha ya Shamba Mkali ya damu nzima
Katika taswira angavu ya damu nzima, WBC hazionekani kati ya seli nyekundu za damu.(Kielelezo 1)
Kielelezo 1 Picha ya uwanja mkali wa damu nzima.
2. Picha ya Fluorescence ya damu nzima
Rangi ya AO na PI zote ni madoa ya DNA kwenye kiini cha seli.Kwa hiyo, Platelets, seli nyekundu za damu, au uchafu wa seli haziwezi kuathiri mkusanyiko wa leukocytes na matokeo ya uwezekano.Leukocytes hai (Kijani) na leukocytes zilizokufa (Nyekundu) zinaonekana kwa urahisi kwenye picha za fluorescence.(Kielelezo 2)
Kielelezo 2 Picha za Fluorescence za damu nzima.(A).Picha ya AO Channel;(B) Picha ya PI Channel;(C) Unganisha picha za AO na PI Channel.
3. Mkusanyiko na uwezekano wa leukocytes
Programu ya Countstar FL huhesabu seli za sehemu tatu za vyumba kiotomatiki na kukokotoa thamani ya wastani ya jumla ya hesabu ya seli za WBC (1202), ukolezi (1.83 x 106 seli/ml), na % uwezo wa kutegemeka (82.04%).Picha zote za damu na data zinaweza kusafirishwa kwa urahisi kama PDF, Picha au Excel kwa uchanganuzi wa ziada au uhifadhi wa data.
Kielelezo cha 3 Picha ya skrini ya Programu ya Countstar Rigel
