లైసింగ్ లేకుండా మొత్తం రక్తంలో ల్యూకోసైట్‌ల ప్రత్యక్ష విశ్లేషణ

మొత్తం రక్తంలోని ల్యూకోసైట్‌లను విశ్లేషించడం అనేది క్లినికల్ ల్యాబ్ లేదా బ్లడ్ బ్యాంక్‌లో ఒక సాధారణ పరీక్ష.ల్యూకోసైట్‌ల ఏకాగ్రత మరియు సాధ్యత అనేది రక్త నిల్వ యొక్క నాణ్యత నియంత్రణగా ముఖ్యమైన సూచిక.ల్యూకోసైట్ కాకుండా, మొత్తం రక్తంలో పెద్ద సంఖ్యలో ప్లేట్‌లెట్లు, ఎర్ర రక్త కణాలు లేదా సెల్యులార్ శిధిలాలు ఉంటాయి, ఇవి మైక్రోస్కోప్ లేదా ప్రకాశవంతమైన ఫీల్డ్ సెల్ కౌంటర్‌లో నేరుగా మొత్తం రక్తాన్ని విశ్లేషించడం అసాధ్యం.తెల్ల రక్త కణాలను లెక్కించడానికి సాంప్రదాయిక పద్ధతులు RBC లైసిస్ ప్రక్రియను కలిగి ఉంటాయి, ఇది సమయం తీసుకుంటుంది.

AOPI డ్యూయల్-ఫ్లోరోసెస్ లెక్కింపు అనేది సెల్ ఏకాగ్రత మరియు సాధ్యతను గుర్తించడానికి ఉపయోగించే పరీక్ష రకం.పరిష్కారం అక్రిడిన్ ఆరెంజ్ (ఆకుపచ్చ-ఫ్లోరోసెంట్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ స్టెయిన్) మరియు ప్రొపిడియం అయోడైడ్ (ఎరుపు-ఫ్లోరోసెంట్ న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ స్టెయిన్) కలయిక.ప్రొపిడియం అయోడైడ్ (PI) అనేది పొర మినహాయింపు రంగు, ఇది రాజీపడిన పొరలతో కణాలలోకి మాత్రమే ప్రవేశిస్తుంది, అయితే యాక్రిడిన్ ఆరెంజ్ జనాభాలోని అన్ని కణాలలోకి చొచ్చుకుపోతుంది.న్యూక్లియస్‌లో రెండు రంగులు ఉన్నప్పుడు, ప్రొపిడియం అయోడైడ్ ఫ్లోరోసెన్స్ రెసొనెన్స్ ఎనర్జీ ట్రాన్స్‌ఫర్ (FRET) ద్వారా యాక్రిడిన్ ఆరెంజ్ ఫ్లోరోసెన్స్‌లో తగ్గింపును కలిగిస్తుంది.ఫలితంగా, చెక్కుచెదరని పొరలతో కూడిన న్యూక్లియేటెడ్ కణాలు ఫ్లోరోసెంట్ ఆకుపచ్చ రంగులో ఉంటాయి మరియు ప్రత్యక్షంగా లెక్కించబడతాయి, అయితే కాంప్రమైజ్డ్ మెంబ్రేన్‌లతో న్యూక్లియేటెడ్ కణాలు ఫ్లోరోసెంట్ ఎరుపు రంగును మాత్రమే మరక చేస్తాయి మరియు కౌంట్‌స్టార్ ® రిగెల్ సిస్టమ్‌ను ఉపయోగిస్తున్నప్పుడు చనిపోయినట్లు లెక్కించబడతాయి.

కౌంట్‌స్టార్ రిగెల్ అనేది అనేక సంక్లిష్ట కణ జనాభా క్యారెక్టరైజేషన్ అస్సేస్‌కు ఆదర్శవంతమైన పరిష్కారం, ఇది మొత్తం రక్తంలోని తెల్ల రక్త కణాలను వేగంగా విశ్లేషించడానికి వీలు కల్పిస్తుంది.

ప్రయోగాత్మక విధానం:

1.20 µl రక్త నమూనాను తీసుకోండి మరియు నమూనాను 180 µl PBSలో పలుచన చేయండి.
2.12µl నమూనాలో 12µl AO/PI ద్రావణాన్ని జోడించి, పైపెట్‌తో శాంతముగా కలపాలి;
3.20µl మిశ్రమాన్ని ఛాంబర్ స్లయిడ్‌లోకి గీయండి;
4. కణాలను దాదాపు 1 నిమిషం పాటు చాంబర్‌లో ఉంచడానికి అనుమతించండి;
5. కౌంట్‌స్టార్ FL ఇన్‌స్ట్రుమెంట్‌లోకి స్లయిడ్‌ను క్రిమిసంహారక చేయండి;
6. “AO/PI వయబిలిటీ” పరీక్షను ఎంచుకోండి, ఆపై ఈ నమూనా కోసం నమూనా IDని నమోదు చేయండి.
7.పలచన నిష్పత్తిని ఎంచుకోండి, సెల్ రకం, పరీక్షను ప్రారంభించడానికి 'రన్' క్లిక్ చేయండి.

హెచ్చరిక: AO మరియు PI ఒక సంభావ్య క్యాన్సర్.చర్మం మరియు కళ్ళతో నేరుగా సంబంధాన్ని నివారించడానికి ఆపరేటర్ వ్యక్తిగత రక్షణ పరికరాలను (PPE) ధరించాలని సిఫార్సు చేయబడింది.

ఫలితం:

1. మొత్తం రక్తం యొక్క ప్రకాశవంతమైన ఫీల్డ్ చిత్రం

మొత్తం రక్తం యొక్క ప్రకాశవంతమైన ఫీల్డ్ ఇమేజ్‌లో, ఎర్ర రక్త కణంలో WBC లు కనిపించవు.(చిత్రం 1)

మూర్తి 1 మొత్తం రక్తం యొక్క ప్రకాశవంతమైన క్షేత్ర చిత్రం.

2. మొత్తం రక్తం యొక్క ఫ్లోరోసెన్స్ చిత్రం

AO మరియు PI రంగు రెండూ కణాల కణ కేంద్రకంలో DNA మరకలు.అందువల్ల, ప్లేట్‌లెట్స్, ఎర్ర రక్త కణాలు లేదా సెల్యులార్ శిధిలాలు ల్యూకోసైట్‌ల ఏకాగ్రత మరియు సాధ్యత ఫలితాన్ని ప్రభావితం చేయలేవు.ప్రత్యక్ష ల్యూకోసైట్లు (ఆకుపచ్చ) మరియు చనిపోయిన ల్యూకోసైట్లు (ఎరుపు) ఫ్లోరోసెన్స్ చిత్రాలలో సులభంగా దృశ్యమానం చేయబడతాయి.(చిత్రం 2)

మూర్తి 2 మొత్తం రక్తం యొక్క ఫ్లోరోసెన్స్ చిత్రాలు.(ఎ)AO ఛానెల్ యొక్క చిత్రం;(B) PI ఛానెల్ యొక్క చిత్రం;(C) AO మరియు PI ఛానెల్ యొక్క చిత్రాలను విలీనం చేయండి.

3. ల్యూకోసైట్స్ యొక్క ఏకాగ్రత మరియు సాధ్యత

Countstar FL సాఫ్ట్‌వేర్ స్వయంచాలకంగా మూడు ఛాంబర్ విభాగాల కణాలను గణిస్తుంది మరియు మొత్తం WBC సెల్ కౌంట్ (1202), ఏకాగ్రత (1.83 x 106 కణాలు/ml) మరియు % సాధ్యత (82.04%) సగటు విలువను గణిస్తుంది.అదనపు విశ్లేషణ లేదా డేటా ఆర్కైవింగ్ కోసం మొత్తం రక్త చిత్రాలు మరియు డేటా సులభంగా PDF, ఇమేజ్ లేదా ఎక్సెల్‌గా ఎగుమతి చేయబడతాయి.

మూర్తి 3 కౌంట్‌స్టార్ రిగెల్ సాఫ్ట్‌వేర్ యొక్క స్క్రీన్‌షాట్