Реферат: Ҳуҷайраҳои бунёдии мезенхимӣ як зермаҷмӯи ҳуҷайраҳои бунёдии плюрипотентӣ мебошанд, ки онҳоро аз мезодерма ҷудо кардан мумкин аст.Бо таҷдиди худпликатсия ва хусусиятҳои тафриқавии бисёрсамти худ, онҳо дорои потенсиали баланд барои табобатҳои гуногун дар тиб мебошанд.Ҳуҷайраҳои бунёдии мезенхималӣ дорои фенотипи беназири иммунӣ ва қобилияти танзими иммунӣ мебошанд.Аз ин рӯ, ҳуҷайраҳои бунёдии мезенхималӣ аллакай дар трансплантатсияи ҳуҷайраҳои бунёдӣ, муҳандисии бофтаҳо ва трансплантатсияи узвҳо васеъ истифода мешаванд.Ғайр аз ин барномаҳо, онҳо ҳамчун як воситаи идеалӣ дар муҳандисии бофтаҳо ҳамчун ҳуҷайраҳои тухмипошак дар як қатор таҷрибаҳои тадқиқотии асосӣ ва клиникӣ истифода мешаванд.То ба имрӯз, усул ва стандарти маъмули назорати сифати ҳуҷайраҳои бунёдии мезенхималӣ вуҷуд надорад.Countstar Rigel метавонад консентратсия, қобилият ва хусусиятҳои фенотипро (ва тағирёбии онҳоро) ҳангоми истеҳсол ва фарқияти ин ҳуҷайраҳои бунёдӣ назорат кунад.Countstar Rigel инчунин дар ба даст овардани маълумоти иловагии морфологӣ бартарият дорад, ки тавассути сабти тасвири доимии майдони равшанӣ ва флуоресцентӣ дар давоми тамоми раванди мониторинги сифати ҳуҷайра таъмин карда мешавад.Countstar Rigel усули зуд, мураккаб ва боэътимодро барои назорати сифати ҳуҷайраҳои бунёдӣ пешниҳод мекунад.
Мавод ва усул:
Ҳуҷайраҳои бунёдии мезенхималии равғанӣ (AdMSCs) аз ҷониби профессор Нианмин Ци, маҳлули рангкунии AO/PI (Shanghai RuiYu, CF002) тӯҳфа карда шудаанд.Антитело: CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLADR (Ширкати BD).
AdMSCs дар инкубатори намнокшудаи 37 ℃, 5% CO2 парвариш карда шуданд.Пеш аз истифода бо трипсин ҳазм кунед.
Тартиби ранг кардани маркери CD ҳамчун дастури антитело риоя карда шуд.
Муайян кардани аломати CD бо Countstar Rigel:
1. Тартиби татбиқи сигнал-ранг тавассути танзими канали PE ба флуорессенси тасвири PE сохта шудааст.
2. Аз хар палата 3 майдон гирифта шуд.
3. Пас аз анҷом додани тасвир ва таҳлили ибтидоӣ, танзими ҳадди (дарвозаи журнал) барои интиқоли мусбат ва манфӣ аз ҷониби нармафзори FCS муқаррар карда шуд.
Назорати сифати ҳуҷайраҳои бунёдӣ
Дар расми зерин (расми 1) тартиби кор нишон дода шудааст терапияи ҳуҷайраҳои бунёдӣ .
Расми 1: Тартиби табобати ҳуҷайраҳои бунёдӣ
Натиҷаҳо:
Муайян кардани консентратсия, қобилият, диаметр ва ҷамъшавии AdMSCs.
Қобилияти AdMSCs аз ҷониби AO/PI муайян карда шуд, Тартиби истифодаи дукарата тавассути танзими канали сабз ва канали сурх ба тасвири AO ва PI флуорессенсия ва инчунин майдони равшан сохта шуд.Намунаҳои тасвирҳо дар расми 2 нишон дода шудаанд.
Расми 2. Тасвирҳои пеш аз интиқол ва пас аз интиқоли AdMSCs.A. Пеш аз интиқол;тасвири намояндагӣ нишон дода мешавад.B. Баъди интиқол;тасвири намояндагӣ нишон дода мешавад.
Қобилияти ҳаёти AdMSCs пас аз интиқол дар муқоиса бо пеш аз интиқол ба таври ҷиддӣ тағйир ёфт.Қобилияти ҳаёт пеш аз интиқол 92% буд, аммо пас аз интиқол он ба 71% кам шуд.Натиҷа дар расми 3 нишон дода шудааст.
Тасвири 3. Натиҷаҳои қобили зисти AdMSCs (Пеш аз интиқол ва пас аз интиқол)
Диаметр ва агрегатсияро Countstar Rigel низ муайян кардааст.Диаметри AdMSCs пас аз интиқол дар муқоиса бо пеш аз интиқол ба таври ҷиддӣ тағйир ёфт.Диаметри пеш аз интиқол 19 микрон буд, аммо пас аз интиқол он ба 21 микрон зиёд шуд.Ҷамъоварии пеш аз нақлиёт 20 фоизро ташкил медод, пас аз интиқол то 25 фоиз афзуд.Аз тасвирҳои аз ҷониби Countstar Rigel гирифташуда, фенотипи AdMSCs пас аз интиқол ба таври ҷиддӣ тағир ёфт.Натиҷаҳо дар расми 4 нишон дода шудаанд.
Расми 4: Натиҷаҳои диаметр ва ҷамъоварӣ.A: Тасвирҳои намояндагии AdMSCs, фенотипи AdMSCs пас аз интиқол ба таври ҷиддӣ тағир ёфтанд.B: Ҷамъоварӣ пеш аз интиқол 20% буд, аммо пас аз интиқол он ба 25% афзуд.C: Диаметри пеш аз интиқол 19µm буд, аммо пас аз интиқол он ба 21µm зиёд шуд.
Иммунофенотипи AdMSC-ро аз ҷониби Countstar Rigel муайян кунед
Иммунофенотипи AdMSCs аз ҷониби Countstar Rigel муайян карда шуд, AdMSCs мутаносибан бо антителоҳои гуногун инкубатсия карда шуданд (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105, HLA-DR).Тартиби татбиқи ранги сигнал тавассути гузоштани канали сабз ба тасвири флуорессенсияи PE ва майдони дурахшон сохта шудааст.Сегментатсияи истинод ба расми саҳроӣ ҳамчун ниқоб барои намунаи сигнали флуорессенси PE истифода шуд.Натиҷаҳои CD105 нишон дода шудаанд (расми 5).
Тасвири 5: Натиҷаҳои CD105-и AdMSC аз ҷониби Countstar Rigel муайян карда шуданд.A: Таҳлили миқдории фоизи мусбати CD105 дар намунаҳои гуногун аз ҷониби FCS express 5 plus нармафзор.B: Тасвирҳои баландсифат маълумоти иловагии морфологиро таъмин мекунанд.C: Натиҷаҳои тасдиқшуда аз рӯи расмҳои ҳар як ҳуҷайра, асбобҳои нармафзори FCS ҳуҷайраҳоро аз рӯи ифодаи сафедаи гуногунашон ба гурӯҳҳои гуногун тақсим карданд.
Натиҷаҳои дигари антитело дар расми 6 нишон дода шудаанд
Расми 6: A: Тасвири намояндагии ASCs бо морфологияи маъмулии шпиндель.Бо микроскопи OLYMPUS гирифта шудааст.Баландшавии аслӣ, (10х).B: Тафовути адипогении ASCs бо рангкунии Рутении Сурх, ки минтақаҳои минерализатсияро нишон медиҳанд, шаҳодат медиҳанд.Бо микроскопи OLYMPUS гирифта шудааст.Баландшавии аслӣ (10х).C: Тавсифи Countstar FL аз ASCs.
Хулоса:
Countstar FL метавонад консентратсия, қобилият ва хусусиятҳои фенотипро (ва тағйироти онҳоро) ҳангоми истеҳсол ва фарқияти ин ҳуҷайраҳои бунёдӣ назорат кунад.FCS экспресс функсияро барои баррасии ҳар як ҳуҷайраи сигнал, тасдиқи маълумот тавассути тасвир таъмин мекунад.Истифодабаранда инчунин метавонад боварӣ дошта бошад, ки таҷрибаҳои навбатиро дар асоси натиҷаҳои Countstar Rigel анҷом диҳад.Countstar Rigel усули зуд, мураккаб ва боэътимодро барои назорати сифати ҳуҷайраҳои бунёдӣ пешниҳод мекунад.
