Таҳлили лейкоситҳо дар хуни умумӣ як санҷиши муқаррарӣ дар лабораторияи клиникӣ ё бонки хун мебошад.Консентратсияи лейкоситҳо нишондиҳандаи муҳими назорати сифати нигоҳдории хун мебошанд.Ба ғайр аз лейкоситҳо, хуни пурра дорои миқдори зиёди тромбоцитҳо, ҳуҷайраҳои сурхи хун ё партовҳои ҳуҷайра мебошад, ки таҳлили бевоситаи хуни тамоми хунро дар зери микроскоп ё ҳисобкунаки ҳуҷайраҳои саҳроӣ ғайриимкон месозад.Усулҳои анъанавии ҳисоб кардани ҳуҷайраҳои сафеди хун раванди лизиси RBC-ро дар бар мегиранд, ки вақтро мегирад.
AOPI Ҳисобкунии дугонаи флуоресцентҳо як навъи таҳлилест, ки барои муайян кардани консентратсияи ҳуҷайра ва қобили ҳаёт истифода мешавад.Маҳлул омезиши афлесуни акридин (доғи кислотаи нуклеинӣ сабз-флуоресцентӣ) ва йодиди пропидиум (доғи сурх-флуоресцентии кислотаи нуклеинӣ) мебошад.Йодид пропидиум (PI) як ранги истисноии мембрана аст, ки танҳо ба ҳуҷайраҳои дорои мембранаҳои вайроншуда ворид мешавад, дар ҳоле ки афлесун акридин метавонад ба ҳама ҳуҷайраҳои популятсия ворид шавад.Вақте ки ҳарду ранг дар ядро мавҷуданд, йодиди пропидиум боиси коҳиши флуорессенсияи афлесунии акридин тавассути интиқоли энергияи резонанси флуоресцентӣ (FRET) мегардад.Дар натиҷа, ҳуҷайраҳои ядроӣ бо мембранаҳои солим ба ранги сабзи флуоресцентӣ ранг мекунанд ва ҳамчун зинда ҳисобида мешаванд, дар ҳоле ки ҳуҷайраҳои ядроӣ бо мембранаҳои осебдида танҳо ранги флуоресцентиро ранг мекунанд ва ҳангоми истифодаи системаи Countstar® Rigel мурда ҳисобида мешаванд.
Countstar Rigel як ҳалли беҳтарин барои бисёре аз таҳлилҳои мураккаби тавсифи популятсияи ҳуҷайраҳо мебошад, ки имкон медиҳад, ки ҳуҷайраҳои сафед-хуниро дар тамоми хун зуд таҳлил кунанд.
Раванди таҷрибавӣ:
1. 20 мкл намунаи хун гиред ва намунаро дар 180 мкл PBS маҳлул кунед.
2. Ба намунаи 12мл маҳлули 12мл AO/PI илова кунед, бо пипетка бо нарм омехта кунед;
3.Омехтаи 20мл ба слайди камера кашед;
4.Иҷозат диҳед, ки ҳуҷайраҳо дар камера тақрибан 1 дақиқа ҷойгир шаванд;
5.Слайдро ба асбоби Countstar FL ҳашарот кунед;
6.Таҳлили "AO/PI Viability" -ро интихоб кунед, пас барои ин намуна ID намунаро ворид кунед.
7. Таносуби маҳлул, Навъи чашмакро интихоб кунед, "Иҷроиш" -ро клик кунед, то санҷишро оғоз кунед.
Огоҳӣ: AO ва PI як канцерогени эҳтимолӣ мебошанд.Тавсия дода мешавад, ки оператор таҷҳизоти муҳофизати инфиродӣ (PPE) пӯшад, то аз тамоси мустақим бо пӯст ва чашм пешгирӣ кунад.
Натиҷа:
1. Тасвири майдони равшани хуни пурра
Дар тасвири майдони равшани тамоми хун, WBC дар байни ҳуҷайраҳои сурхи хун намоён нестанд.(Расми 1)
Расми 1 Тасвири майдони равшани хуни пурра.
2. Тасвири флуоресцентии хуни пурра
Рангҳои AO ва PI ҳарду доғҳои ДНК дар ядрои ҳуҷайраҳои ҳуҷайра мебошанд.Аз ин рӯ, тромбоцитҳо, ҳуҷайраҳои сурхи хун ё партовҳои ҳуҷайра ба консентратсияи лейкоситҳо ва натиҷаи қобили ҳаёт таъсир карда наметавонанд.Лейкоцитҳои зинда (сабз) ва лейкоситҳои мурда (сурх) дар тасвирҳои флуоресцентӣ ба осонӣ тасвир карда мешаванд.(Расми 2)
Тасвири 2 Тасвирҳои флуоресцентии хуни пурра.(А).Тасвири канали AO;$B) Тасвири канали PI;(C) Якҷоя кардани тасвирҳои AO ва PI Channel.
3. Консентратсия ва кобилияти лейкоситхо
Нармафзори Countstar FL ба таври худкор ҳуҷайраҳои се қисмати камераро ҳисоб мекунад ва арзиши миёнаи шумораи умумии ҳуҷайраҳои WBC (1202), консентратсия (1,83 x 106 ҳуҷайра/мл) ва қобилиятнокии% (82,04%) ҳисоб мекунад.Тасвирҳо ва маълумоти пурраи хунро метавон ба осонӣ ҳамчун PDF, тасвир ё Excel барои таҳлили иловагӣ ё бойгонии маълумот содир кард.
расм 3 Скриншот аз нармафзори Countstar Rigel
