Süspansiyonda hücreler içeren bir numune, Trypan mavi boyası ile karıştırılıyor ve ardından Countstar Automated Cell Counter tarafından analiz edilen Countstar Chamber Slide'a çekiliyor.Klasik tripan mavi hücre sayma ilkesine dayanan Countstar'ın cihazları, gelişmiş optik görüntüleme teknolojisi, akıllı görüntü tanıma teknolojisi ve güçlü yazılım algoritmalarını entegre ederek yalnızca hücre konsantrasyonu ve canlılığını sağlamakla kalmaz, aynı zamanda hücre konsantrasyonu, canlılığı, toplama hızı, yuvarlaklık bilgilerini de sağlar. , ve sadece bir işlemle çap dağılımı.
Toplu Hücre Analizi
Şekil 3 Toplanan hücrelerin sayımı.
A. Hücre örneğinin görüntüsü;
B. Countstar BioTech yazılımı tarafından tanımlama işaretli Hücre Numunesinin görüntüsü.(Yeşil Daire: Canlı hücre, Sarı Daire: Ölü hücre, Kırmızı Daire: Toplu Hücre).
C. Toplu Histogram
Bazı birincil hücreler veya alt kültür hücreleri, zayıf kültür durumu veya aşırı sindirim olduğunda toplanmaya eğilimlidir, bu nedenle hücrelerin sayılmasında büyük zorluklara neden olur.Toplama Kalibrasyon İşlevi ile Countstar, doğru hücre sayımını sağlamak ve toplama oranını ve toplama histogramını elde etmek için toplamaların bir uyarım hesaplamasını gerçekleştirebilir, böylece deneycilerin hücrelerin durumunu yargılaması için temel sağlar.
Hücre Büyümesinin İzlenmesi
Şekil 4 Hücre Büyüme Eğrisi.
Hücre büyüme eğrisi, hücre sayısının mutlak büyümesini ölçmek için yaygın bir yöntem, hücre konsantrasyonunu belirlemek için önemli bir gösterge ve hücrelerin temel biyolojik özelliklerinin kültürü için temel parametrelerden biridir.Tüm süreç boyunca hücre sayısındaki dinamik değişimi doğru bir şekilde tanımlamak için, tipik büyüme eğrisi 4 bölüme ayrılabilir: yavaş büyümeli kuluçka dönemi;büyük eğimli üstel büyüme evresi, plato evresi ve düşüş dönemi.Hücre büyüme eğrisi, canlı hücre sayısının (10'000/mL) kültür süresine (h veya d) karşı çizilmesiyle elde edilebilir.
Hücre Konsantrasyonunu ve Canlılığını Ölçme
Şekil 1 Süspansiyondaki hücreler (Vero, 3T3, 549, B16, CHO, Hela, SF9 ve MDCK) sırasıyla Trypan Blue ile boyanırken, görüntüler Countstar BioTech tarafından yakalandı.
Countstar, memeli hücresi, böcek hücresi ve bazı planktonlar gibi çapı 5-180 um arasında olan hücrelere uygulanabilir.
Hücre Boyutu Ölçümü
Şekil 2 Plazmit transfeksiyonundan önce ve sonra CHO hücrelerinin Hücre Boyutu Ölçümü.
A. Plazmit transfeksiyonundan önce ve sonra tripan mavisi ile boyanmış CHO hücreleri süspansiyonunun görüntüleri.
B. Plazmit transfeksiyonundan önce ve sonra CHO hücre boyutu histogramının karşılaştırılması.
Hücre boyutunun değişimi önemli bir özelliktir ve hücre araştırmalarında yaygın olarak ölçülür.Normalde bu deneylerde ölçülecektir: hücre transfeksiyonu, ilaç testi ve hücre aktivasyon deneyleri.Countstar, hücrelerin boyutları gibi istatistiksel morfoloji verilerini 20 saniye içinde sağlar.
Countstar otomatik hücre sayacı, dairesellik ve çap histogramları dahil olmak üzere hücrelerin morfolojik verilerini verebilir.
