İmmüno-fenotipleme analizi, çeşitli hastalıkları (otoimmün hastalık, immün yetmezlik hastalığı, tümör teşhisi, hemostaz, alerjik hastalıklar ve daha birçok) ve hastalık patolojisini teşhis etmek için hücre ile ilgili araştırma alanlarında gerçekleştirilen tipik bir deneydir.Çeşitli hücre hastalıkları araştırmalarında hücre kalitesini test etmek için de kullanılır.Akış sitometrisi ve floresan mikroskobu, immün fenotipleme için kullanılan hücre hastalıkları araştırma enstitülerinde rutin analiz yöntemleridir.Ancak bu analiz yöntemleri, yalnızca düzenleyici makamların katı onay gereksinimlerini karşılamayabilecek görüntüler veya veri serileri sağlayabilir.
M Dominici el, Cytotherapy (2006) Cilt.8, No. 4, 315-317
AdMSC'lerin İmmüno-fenotipinin Tanımlanması
AdMSC'lerin immünofenotipi Countstar FL tarafından belirlendi, AdMSC'ler sırasıyla farklı antikorlarla (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 ve HLADR) inkübe edildi.Yeşil kanal görüntü PE floresansına artı bir parlak alana ayarlanarak bir sinyal rengi uygulama prosedürü oluşturuldu.PE floresan sinyalini örneklemek için bir maske olarak parlak alan resmi referans bölütlemesi uygulandı.CD105'in sonuçları gösterildi (Şekil 1).
Şekil 1 AdMSC'lerin İmmüno-fenotipinin Tanımlanması.A. AdMSC'lerin Parlak Alanı ve Floresan Görüntüsü;B. Countstar FL tarafından AdMSC'lerin CD İşaretçisi Tespiti
MSC'lerin kalite kontrolü – her bir hücre için sonuçların doğrulanması
Şekil 2 A: Countstar FL sonuçları, FCS express 5plus'ta görüntülendi, CD105'in pozitif yüzdesini ve genel bakış tablosu tekli hücrelerini kapladı.B: Sağ tarafa ayarlanmış geçit, tek hücre tablosunun görüntüleri, CD105'in yüksek ekspresyonuna sahip hücreleri gösterir.C: Sol tarafa ayarlanan geçit, tek hücre tablosunun görüntüleri, CD105'in düşük ekspresyonuna sahip hücreleri gösterir.
Taşıma Sırasında Fenotipik Değişiklikler
Şekil 3. A: FCS express 5 plus yazılımı ile farklı örneklerde CD105'in pozitif yüzdesinin kantitatif analizi.B: Yüksek kaliteli görüntüler ek morfolojik bilgiler sağlar.C: Her bir hücrenin küçük resimleriyle doğrulanmış sonuçlar, FCS yazılım araçları hücreleri farklı bölümlere ayırdı