Аналіз імунофенотипування – це типовий експеримент, який проводиться в галузях, пов’язаних із клітинними дослідженнями, для діагностики різних захворювань (аутоімунні захворювання, імунодефіцитні захворювання, діагностика пухлин, гемостаз, алергічні захворювання та багато іншого) та патології захворювань.Він також використовується для перевірки якості клітин у різних дослідженнях клітинних захворювань.Проточна цитометрія та флуоресцентний мікроскоп є рутинними методами аналізу в інститутах дослідження клітинних хвороб, які використовуються для імунофенотипування.Але ці методи аналізу можуть надавати лише зображення або ряди даних, які можуть не відповідати суворим вимогам схвалення контролюючих органів.
M Dominici el, Цитотерапія (2006) Vol.8, No 4, 315-317
Ідентифікація імунофенотипу AdMSC
Імунофенотип AdMSC визначали за допомогою Countstar FL, AdMSC інкубували з різними антитілами відповідно (CD29, CD34, CD45, CD56, CD73, CD105 і HLADR).Процедура застосування кольору сигналу була створена шляхом встановлення зеленого каналу на зображення флуоресценції PE, а також яскраве поле.Сегментація опорного зображення яскравого поля була застосована як маска для вибірки сигналу флуоресценції PE.Були показані результати CD105 (рис. 1).
Рисунок 1. Ідентифікація імунофенотипу AdMSC.A. Яскраве поле та флуоресцентне зображення AdMSC;B. Виявлення маркерів компакт-дисків AdMSC Countstar FL
Контроль якості MSC – перевірка результатів для кожної окремої клітинки
Малюнок 2 A: Результати Countstar FL були відображені в FCS express 5plus, визначаючи позитивний відсоток CD105, та оглядову таблицю окремих клітинок.B: Налаштований строб з правого боку, зображення однієї клітинної таблиці показують клітини з високою експресією CD105.C: Налаштований строб ліворуч, зображення окремих клітин в таблиці показують клітини з низькою експресією CD105.
Фенотипічні зміни під час транспортування
Малюнок 3. A: Кількісний аналіз позитивного відсотка CD105 у різних зразках за допомогою програмного забезпечення FCS express 5 plus.B: Високоякісні зображення надають додаткову морфологічну інформацію.C: Перевірені результати за мініатюрами кожної окремої клітинки, програмні засоби FCS розділили клітинки на різні