سٹیم سیل تھراپی کے لیے قابل عملیت، مورفولوجی اور فینوٹائپ کا تعین

Mesenchymal اسٹیم سیلز pluripotent اسٹیم سیلز کا ایک ذیلی سیٹ ہیں جنہیں mesoderm سے الگ تھلگ کیا جاسکتا ہے۔ان کی خود نقل کی تجدید اور کثیر جہتی تفریق کی خصوصیات کے ساتھ، وہ طب میں مختلف علاج کی اعلی صلاحیت کے مالک ہیں۔Mesenchymal اسٹیم سیلز میں ایک منفرد مدافعتی فینوٹائپ اور مدافعتی ضابطے کی صلاحیت ہوتی ہے۔لہذا، mesenchymal اسٹیم سیل پہلے سے ہی اسٹیم سیل ٹرانسپلانٹیشن، ٹشو انجینئرنگ اور اعضاء کی پیوند کاری میں بڑے پیمانے پر استعمال ہوتے ہیں۔اور ان ایپلی کیشنز کے علاوہ، وہ ٹشو انجینئرنگ میں ایک مثالی ٹول کے طور پر بنیادی اور طبی تحقیقی تجربات کی ایک سیریز میں سیڈر سیلز کے طور پر استعمال ہوتے ہیں۔

Countstar Rigel ان سٹیم سیلز کی پیداوار اور تفریق کے دوران ارتکاز، قابل عملیت، apoptosis کے تجزیہ اور فینوٹائپ کی خصوصیات (اور ان کی تبدیلیوں) کی نگرانی کر سکتا ہے۔Countstar Rigel کو اضافی مورفولوجیکل معلومات حاصل کرنے میں بھی فائدہ ہے، جو سیل کے معیار کی نگرانی کے پورے عمل کے دوران مستقل روشن فیلڈ اور فلوروسینس پر مبنی تصویری ریکارڈنگ کے ذریعے فراہم کی جاتی ہے۔کاؤنٹ اسٹار ریگل اسٹیم سیلز کے کوالٹی کنٹرول کے لیے ایک تیز، نفیس اور قابل اعتماد طریقہ پیش کرتا ہے۔

دوبارہ پیدا کرنے والی دوائیوں میں MSCs کی عملداری کی نگرانی

شکل 1 سیل کے علاج میں استعمال کے لیے mesenchymal اسٹیم سیلز (MSCs) کی عملداری اور سیل کی گنتی کی نگرانی

سٹیم سیل ریجنریٹیو سیل تھراپیوں میں سب سے زیادہ امید افزا علاج ہے۔MSC کی کٹائی سے لے کر علاج تک، سٹیم سیل کی پیداوار کے تمام مراحل کے دوران اعلیٰ سٹیم سیل کی قابل عملیت کو برقرار رکھنا ضروری ہے (شکل 1)۔Countstar کا اسٹیم سیل کاؤنٹر کوالٹی کنٹرول میں اہم کردار ادا کرنے کے لیے اسٹیم سیل کی قابل عملیت اور ارتکاز پر نظر رکھتا ہے۔

نقل و حمل کے بعد MSC مورفولوجیکل تبدیلیوں کی نگرانی

قطر اور جمع کا تعین بھی Countstar Rigel نے کیا تھا۔نقل و حمل سے پہلے کے مقابلے میں جب AdMSCs کا قطر نقل و حمل کے بعد یکسر بدل گیا تھا۔نقل و حمل سے پہلے کا قطر 19µm تھا، لیکن نقل و حمل کے بعد یہ بڑھ کر 21µm ہو گیا۔نقل و حمل سے پہلے کی جمع 20% تھی، لیکن نقل و حمل کے بعد یہ بڑھ کر 25% ہو گئی۔کاؤنٹ اسٹار ریگل کی طرف سے کیپچر کی گئی تصاویر سے، نقل و حمل کے بعد ایڈ ایم ایس سی کی فینوٹائپ یکسر تبدیل ہو گئی تھی۔نتائج کو شکل 3 میں دکھایا گیا ہے۔

سیل فینوٹائپ میں AdMSCs کی شناخت

فی الحال نگرانی شدہ MSCs کے معیار کی یقین دہانی کے لیے کم از کم معیاری شناختی ٹیسٹ کے طریقہ کار کو انٹرنیشنل سوسائٹی فار سیلولر تھراپی (ISCT) کے ایک بیان میں درج کیا گیا ہے، جس کی وضاحت پہلے ہی 2006 میں کی گئی ہے۔

FITC کنجوگیٹڈ Annexin-V اور 7-ADD تعارف کے ساتھ MSCs میں Apoptosis کا تیزی سے پتہ لگانا

سیل اپوپٹوس کا پتہ FITC کنجوگیٹڈ annexin-V اور 7-ADD سے لگایا جا سکتا ہے۔PS عام طور پر صرف صحت مند خلیوں میں پلازما جھلی کے انٹرا سیلولر لیفلیٹ پر پایا جاتا ہے، لیکن ابتدائی apoptosis کے دوران، جھلی کی ہم آہنگی ختم ہو جاتی ہے اور PS بیرونی لیفلیٹ میں منتقل ہو جاتا ہے۔

شکل 6 کاؤنٹر اسٹار ریگل کے ذریعہ MSCs میں اپوپٹوس کا پتہ لگانا

A. MSCs میں Apoptosis کی کھوج کی فلوروسینس امیج کا بصری معائنہ
B. FCS ایکسپریس کے ذریعے MSCs میں Apoptosis کے سکیٹر پلاٹ
C. % نارمل، % apoptotic، اور % necrotic/انتہائی لیٹ سٹیج apoptotic خلیات پر مبنی سیل کی آبادی کا فیصد۔