امیونو-فینوٹائپنگ تجزیہ ایک عام تجربہ ہے جو سیل سے متعلق تحقیقی شعبوں میں مختلف بیماریوں کی تشخیص کے لیے کیا جاتا ہے (آٹو امیون بیماری، مدافعتی بیماری، ٹیومر کی تشخیص، ہیموسٹاسس، الرجک امراض، اور بہت کچھ) اور بیماری کی پیتھالوجی۔یہ سیل کی مختلف بیماریوں کی تحقیق میں سیل کے معیار کو جانچنے کے لیے بھی استعمال کیا جاتا ہے۔فلو سائٹومیٹری اور فلوروسینس مائیکروسکوپ خلیوں کی بیماریوں کے تحقیقی اداروں میں معمول کے تجزیہ کے طریقے ہیں جو امیونو فینوٹائپنگ کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔لیکن تجزیہ کرنے کے یہ طریقے صرف تصاویر یا ڈیٹا سیریز فراہم کر سکتے ہیں، جو ہو سکتا ہے کہ ریگولیٹری حکام کی سخت منظوری کے تقاضوں کو پورا نہ کریں۔
M Dominici el، Cytotherapy (2006) والیوم۔8، نمبر 4، 315-317
AdMSCs کے امیونو فینوٹائپ کی شناخت
AdMSCs کے امیونو فینوٹائپ کا تعین Countstar FL کے ذریعے کیا گیا تھا، AdMSCs کو بالترتیب مختلف اینٹی باڈی (CD29، CD34، CD45، CD56، CD73، CD105، اور HLADR) کے ساتھ لگایا گیا تھا۔گرین چینل کو امیج PE فلوروسینس کے علاوہ ایک روشن فیلڈ میں سیٹ کرکے سگنل کلر ایپلیکیشن کا طریقہ کار بنایا گیا تھا۔PE فلوروسینس سگنل کے نمونے کے لیے برائٹ فیلڈ پکچر ریفرنس سیگمنٹیشن کو ماسک کے طور پر لاگو کیا گیا تھا۔CD105 کے نتائج دکھائے گئے (شکل 1)۔
شکل 1 ایڈ ایم ایس سی کے امیونو فینوٹائپ کی شناخت۔A. AdMSCs کی روشن فیلڈ اور فلوروسینس امیج؛B. Countstar FL کے ذریعے AdMSCs کی CD مارکر کا پتہ لگانا
MSCs کا کوالٹی کنٹرول – ہر ایک سیل کے لیے نتائج کی توثیق کرنا
شکل 2 A: کاؤنٹ اسٹار FL کے نتائج FCS ایکسپریس 5plus میں دکھائے گئے، CD105 کی مثبت فیصد اور اوور ویو ٹیبل سنگل سیلز۔B: گیٹنگ کو دائیں جانب ایڈجسٹ کیا گیا، سنگل سیل ٹیبل کی تصاویر CD105 کے اعلی اظہار کے ساتھ ان خلیوں کو دکھاتی ہیں۔C: بائیں جانب گیٹنگ کو ایڈجسٹ کیا گیا، سنگل سیل ٹیبل کی تصاویر CD105 کے کم اظہار کے ساتھ ان سیلز کو دکھاتی ہیں۔
نقل و حمل کے دوران فینوٹائپیکل تبدیلیاں
شکل 3. A: FCS ایکسپریس 5 پلس سافٹ ویئر کے ذریعے مختلف نمونوں میں CD105 کے مثبت فیصد کا مقداری تجزیہ۔B: اعلیٰ معیار کی تصاویر اضافی مورفولوجیکل معلومات فراہم کرتی ہیں۔C: ہر ایک سیل کے تھمب نیلز کے ذریعے توثیق شدہ نتائج، FCS سافٹ ویئر ٹولز نے سیل کو مختلف حصوں میں تقسیم کیا۔
