Eksperimental protokol
Sitotoksiklik % quyidagi tenglama bilan hisoblanadi.
Sitotoksiklik % = (Nazoratning jonli soni – Davolanganlarning jonli soni) / Nazoratning jonli soni × 100
Maqsadli o'simta hujayralarini toksik bo'lmagan, radioaktiv bo'lmagan kaltsein AM bilan belgilash yoki GFP bilan transfektsiya qilish orqali biz o'simta hujayralarining CAR-T hujayralari tomonidan o'ldirilishini kuzatishimiz mumkin.Tirik maqsadli saraton hujayralari yashil kaltsin AM yoki GFP bilan etiketlanadi, o'lik hujayralar yashil bo'yoqni saqlay olmaydi.Hoechst 33342 barcha hujayralarni (ham T hujayralarini, ham o'simta hujayralarini) bo'yash uchun ishlatiladi, muqobil ravishda maqsadli o'simta hujayralarini membrana bilan bog'langan kalsein AM bilan bo'yash mumkin, PI o'lik hujayralarni (ham T hujayralari, ham o'simta hujayralari) bo'yash uchun ishlatiladi.Ushbu bo'yash strategiyasi turli hujayralarni kamsitish imkonini beradi.
E: T nisbatiga bog'liq K562 sitotoksikligi
Misol Hoechst 33342, CFSE, PI floresan tasvirlari t = 3 soatda K562 maqsadli hujayralardir.
Olingan lyuminestsent tasvirlar E: T nisbati oshishi bilan Hoechst + CFSE + PI + maqsadli hujayralar o'sishini ko'rsatdi.
